荧光标记RM-1-GFP细胞 NCI-H295R细胞株 人肾上腺皮质腺癌细胞 NCI-H205细胞株 人肾上腺腺瘤细胞 APP-PS1细胞株 人胚肾细胞 HKC细胞株 人胚肾上皮细胞 CCC-HB-2细胞株 人胚胎膀胱组织来源细胞 293T/17细胞株 人胚肾细胞(SV40T基因修饰细胞) HEL细胞株 二倍体细胞 KiMA细胞株 人胚肾上皮细胞系 FC33细胞株 人胚胎肾细胞(Asp-2基因修饰细胞) FIP293细胞株 人胚胎肾细胞(Rabll-FIP基因修饰细胞) 293E细胞株 人胚肾细胞(EBNA1基因修饰细胞) 293ET细胞株 人胚肾细胞(SV40T和 EBNA1基因修饰细胞) 293KB细胞株 人胚肾细胞(Kb基因修饰细胞) 293 001A细胞株 人胚肾细胞(Sars结构蛋白基因修饰细胞) 293 001B细胞株 人胚肾细胞(Sars结构蛋白基因修饰细胞) 293sars181A细胞株 人胚肾细胞(Sars结构蛋白基因修饰细胞) T24细胞株 人膀胱移行细胞癌细胞 Caki-2细胞株 人肾透明细胞癌细胞 SCaBER细胞株 人膀胱鳞癌细胞 SF767细胞株 人脑瘤细胞 JEG-3/VP16细胞株 人绒癌细胞耐药株 JEG-3/VP16-IL-2细胞株 耐VP16绒癌细胞(IL-2基因修饰细胞) JEG-3-VP16-TNFa细胞株 耐 VP16绒癌细胞(TNFα基因修饰细胞) BE(2)-M17细胞株 人神经母细胞瘤细胞 293FT细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A549细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ AC16细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 荧光标记RM-1-GFP细胞 A253细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A498细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% MEM-EBSS 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 16HBE细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 293细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 786-0细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% RPMI1640 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A-10细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ SF763细胞株 人脑瘤细胞 AA V-293细胞株 腺病毒转化的人胚肾细胞 293 Ad5细胞株 人原胚肾转化细胞 G401细胞株 人肾癌Wilms细胞 实验目的:了解HSP90β反义核酸转染细胞中HSP90β蛋白的表达 实验方法:通过lipofectamine介导将HSP90β反义核酸重组子pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109。 经用G418进行筛选,对筛选出的阳性克隆用western blot检测HSP90β蛋白的表达。 实验结果:pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901,人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR,人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109后,用G418筛选出的阳性克隆,分别被命名为:AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109。 Westernblot检测结果表明,AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白低于其亲本细胞。 实验结论:HSP90β反义核酸可封闭HSP90βmRNA,使pcDNA-HSP90转染的细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白减少,为研究HSP90下调对肿瘤细胞生物学活性的影响提供了实验材料。
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