荧光标记RIN-m5f-GFP细胞 293FT细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A549细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ AC16细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 荧光标记RIN-m5f-GFP细胞 HFT-8810细胞株 人胎儿胸腺细胞株
RWPE-1细胞株 人前列腺上皮细胞 HSAS3细胞株 人皮肤成纤维细胞 HSAS4细胞株 人皮肤成纤维细胞 HSF2细胞株 人皮肤成纤维细胞 SRA01/04细胞株 人晶体上皮细胞永生系 HOS细胞株 人骨肉瘤细胞 MG-63细胞株 人成骨肉瘤细胞 RWPE-2细胞株 人前列腺正常细胞 LNCaP细胞株 人前列腺癌细胞 MCF 7B细胞株 人乳癌细胞 UACC812细胞株 人乳导管瘤细胞 SF17细胞株 人脑瘤细胞 U-87 MG细胞株 人脑星形胶质母细胞瘤细胞 D283细胞株 人脑髓母细胞瘤细胞 HS683细胞株 人脑胶质瘤细胞 SHG-44细胞株 人胶质瘤细胞 U251细胞株 人神经胶质细胞瘤细胞 CCC-ESF-1细胞株 人胚皮肤成纤维细胞 CCC-HSM-2细胞株 人胚胎肌肉组织来源细胞 M-7细胞株 (M-7细胞血清、M-7细胞培养基) M-20细胞株 (M-20细胞血清、M-20细胞培养基) M-22细胞株 (M-22细胞血清、M-22细胞培养基) HSAS1细胞株 人皮肤成纤维细胞 HSAS2细胞株 人皮肤成纤维细胞 A7d细胞株 小鼠骨髓细胞(野生型人 c-kit基因修饰) A253细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A498细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% MEM-EBSS 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 786-0细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% RPMI1640 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A-10细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 实验目的:了解HSP90β反义核酸转染细胞中HSP90β蛋白的表达 实验方法:通过lipofectamine介导将HSP90β反义核酸重组子pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109。 经用G418进行筛选,对筛选出的阳性克隆用western blot检测HSP90β蛋白的表达。 实验结果:pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901,人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR,人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109后,用G418筛选出的阳性克隆,分别被命名为:AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109。 Westernblot检测结果表明,AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白低于其亲本细胞。 实验结论:HSP90β反义核酸可封闭HSP90βmRNA,使pcDNA-HSP90转染的细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白减少,为研究HSP90下调对肿瘤细胞生物学活性的影响提供了实验材料。 16HBE细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 293细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃
|