荧光标记Renca-LUC细胞 MEF细胞 胚胎成纤维细胞 种属:小鼠 JEG-3细胞 绒癌细胞 JEG-3/VP16细胞 绒癌细胞 Jurkat E6-1细胞 白血病细胞 BE(2)-M17细胞 神经母细胞瘤细胞 MDA-MB-157细胞 癌细胞 MDCK细胞 肾细胞 MG-63细胞 骨肉瘤细胞 种属:人 MMQ细胞 垂体瘤细胞 种属:大鼠 NCI-H446细胞 肺癌细胞 种属:人 RPMI8226细胞 骨髓瘤细胞 种属:人 Hep-2细胞 Hep2细胞 上皮细胞 CCC-HSF-1细胞 成纤维细胞 HT-1080细胞 肉瘤细胞 SF17细胞 脑瘤细胞 种属:人 293FT细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A549细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ AC16细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 荧光标记Renca-LUC细胞 A253细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A498细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% MEM-EBSS 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 16HBE细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 293细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 786-0细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% RPMI1640 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ A-10细胞 T25培养瓶 贴壁生长 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃ 实验目的:了解HSP90β反义核酸转染细胞中HSP90β蛋白的表达 实验方法:通过lipofectamine介导将HSP90β反义核酸重组子pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109。 经用G418进行筛选,对筛选出的阳性克隆用western blot检测HSP90β蛋白的表达。 实验结果:pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901,人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR,人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109后,用G418筛选出的阳性克隆,分别被命名为:AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109。 Westernblot检测结果表明,AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白低于其亲本细胞。 实验结论:HSP90β反义核酸可封闭HSP90βmRNA,使pcDNA-HSP90转染的细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白减少,为研究HSP90下调对肿瘤细胞生物学活性的影响提供了实验材料。
|