细胞：VERO C1008（E6）细胞 中文名称：非洲绿猴肾细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）
揭开真核细胞分泌过程的秘密 在真核细胞中,分泌型的脂和蛋白质从高尔基体反面的网络结构逐步移向质膜,该过程受到了载体囊泡网络结构的严格控制。这种囊泡是如何形成的，现在还没有清晰的答案。 蛋白激酶D和磷脂酰肌醇4-激酶IIIβ相互作用，并促进该过程的发生。 人体内有三种蛋白激酶D同工型，PKD1-3。已经知道的至少有两个，PKD1和PKD2，在TGN膜形成载体囊泡中起重要作用； 具体过程仍然不知。磷酸化的膜成分PI(4)P也被认为调节着这个过程。科研人员从而研究了在从TGN到质膜的囊泡运输中，PKD蛋白和PI4K之间的相互关联情况。 在哺乳细胞中有很多的PI4K酶，PI4KIII是一种与酵母的PI4K酶--Pik1同源的蛋白激酶。Pik1在酵母的“高尔基体-细胞表面"运输通路中起作用。 在哺乳细胞中也研究了这个蛋白质。发现三种PKD同工型和PI4KIIIβ共定位于高尔基体复合物中；体外的实验表明，PKD同工型可以促使PI4KIII磷酸化。 PKD1和PKD2可以识别PI4KIIIβ的磷酸化位点Ser294，该位点在酵母Pik1具有保守性。通过使用抗磷酸化位点的抗体，科研人员证实了PKD介导的PI4KIIIβ磷酸化过程在体内也同样发生。
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