细胞：GES-1细胞 中文名称：人胃粘膜细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
研究慢性癫痛大鼠点燃时海马星形胶细胞的激活情况. 方法: 采用马桑内酯慢性癫痫大鼠模型,观察大鼠点燃后海马NF-κBp65和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫细胞化学反应(immunoreactivity,IR)的变化. 结果点燃后1h,海马CA1区GFAP-IR开始增强,4-8h可观察到GFAP-IR阳性细胞数量增多并明显浓染,这种强GFAP-IR持续至点燃后24h； 点燃后1h,NF-κBp65即可在海马CA1区神经元和胶质细胞内表达,主要位于胞核内,至8 h阳性神经元细胞核基本消失而可见大量NF-κBp65-IR阳性的胶质细胞； 双重免疫细胞化学方法显示GFAP/NF-κBp65-IR阳性细胞在点燃后1h即可观察到,4h达高峰,24 h恢复至对照水平. 结论马桑内酯慢性致痫大鼠点燃时星形胶质细胞表现出一种早期而持续的激活,提示反复激活的星形胶质细胞对癫痫的复发可能起重要的作用. |
