人胚肺成纤维细胞 MRC-5细胞 人型支原体(MH)核酸扩增检测试剂盒 原理:本试剂盒选取一对人型支原体(MH)特异性引物和一条特异性荧光探针,通过碱裂解法提取人型支原体(MH)DNA,后者在耐热DNA聚合酶(Taq酶)作用下,配以FQ-Buffer(内含MH2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分,用PCR体外扩增法对人型支原体(MH)DNA的恒定区进行扩增,从而达到快速实时定量检测之目的。 标本采集、保存和运输 1. 适用标本类型:生殖泌尿道分泌物棉拭子等。 2. 标本采集: 男性:取尿道分泌物或细小棉签试子伸入尿道约2~4cm ,略捻试子取出分泌物(应略带黏膜)。将分泌物或棉签试子置入无菌玻璃管,用无菌棉球或橡皮塞将试管塞紧后,密闭送检。 女性:阴道—用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物,再用无菌棉签试子插入宫颈内,停5秒种后略捻试子采取宫颈分泌物(应略带黏膜)。将棉签试子置入无菌玻璃管,用无菌棉球或橡皮塞将试管塞紧后,密闭送检。 尿道—用无菌生理盐水棉球洗净尿道口,再用无菌棉签试子插入尿道约2cm,略捻试子取出分泌物(应略带黏膜)。将棉签试子置入无菌玻璃管,用无菌棉球或橡皮塞将试管塞紧后,密闭送检。 人胚肺成纤维细胞 MRC-5细胞 1.DNA提取 生殖泌尿道分泌物棉拭子:标本试管中加入1ml无菌生理盐水,充分震荡摇匀,吸取液体转至1.5ml离心管,13,000rpm离心3分钟。沉淀加无菌生理盐水1ml充分混匀,13,000rpm离心3分钟,再重复一次。沉淀直接加50μl核酸提取液B(DNA) 充分混匀(提取液用前需室温溶解并充分混匀)后100℃ 10分钟,后13,000rpm离心3分钟,取上清液4μl做PCR反应。 阴性质控品:取50μl阴性质控品,加50μl核酸提取液B充分混匀(提取液用前需室温溶解并充分混匀)后100℃10分钟,13,000rpm离心3分钟,取上清液4μl做PCR反应。 MH阳性质控品:直接取4μl进行PCR扩增,或按照PCR扩增介绍方法进行定量分析。 2.PCR扩增 从试剂盒中取出MH–PCR MIX、Taq酶系,室温融化并振荡混匀后,10,000rpm离心10s。 设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+4管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表: 试剂 MH–PCR MIX Taq酶系 用量 24μl 2μl 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10,000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入26μl,向每管中加入处理后样品(所获得的DNA样品)或MH–阳性定量标准品(使用前用阴性质控品梯度稀释10倍、100倍、1000倍,记为1×10P6PCopies/ml,1×10P5PCopies/ml,1×10P4PCopies/ml)和阴性质控品4μl,10,000rpm瞬时离心30秒。将各反应管放入定量PCR仪器内,按对应顺序设置阴性控品,阳性定量标准品以及未知标本,设置反应体积(30μl)、样品名称、标记荧光基团种类(报告基团为FAM,淬灭基团为TAMRA)和循环条件: ABI PRISM 7700,ABI PRISM5700,ABI GeneAmp 7000 (需要剪掉反应盖),ABI PRISM7300/7500(使用8联管),MJ Opticon(使用8联管)等使用薄壁管的仪器,循环条件:93℃→2分钟,后93℃ 30秒→55℃ 45秒,40个循环。 LightCycler等使用毛细管的仪器,循环条件:93℃→2分钟,后93℃ 5秒→56℃ 45秒,共40个循环。 人胚肺成纤维细胞 MRC-5细胞 3.结果分析判定 反应结束后保存检测数据文件。根据分析后图像调节baseline的start值(3~8),stop值(13~18)以及Threshold值,使Std curve 窗口下的标准曲线达到*(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值),zui后到Reporter窗口下记录仪器自动分析计算出的未知标本数值(Qty-Copies/ml)。 【质控标准】 阴性质控品:全部阴性。 MH-阳性质控品:阳性质控品的 Ct 值均应小于 35.0。 ∣r∣≥0.97(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值)。 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效,全部试验应重新进行。 : 或:tongpaibio索取细胞资料 客服 公司细胞特点:到货时间快,状态稳定,的售后服务,提供长期的技术咨询服务!公司提供复苏细胞,冻存细胞,耐药细胞,细胞染色等服务,提供细胞说明书,鉴定报告。细胞售出规定时间内提供售后。细胞库始终秉持诚实守信、非盈利为目的地争取努力做到快速、效率、及时、地完善产品服务,满足客户们的多类需求。 细胞株查询: 人肺腺癌细胞 Calu-3细胞 人胚肺转化细胞 SL-1细胞 人支气管上皮样细胞 BEAS-2B细胞 人胚肺二倍体细胞 HEL-2细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H226细胞 人肺转化细胞系 AE1201细胞 人胚肺细胞系 KuMA细胞 人胚肺二倍体细胞 HEL-1细胞 人小细胞肺癌细胞 DMS 153细胞 人肺细胞 HLF-a细胞 人胚肺二倍体细胞 KMB-17细胞 人胚肺二倍体细胞 2BS细胞 人胚胎肺成纤维细胞 WI-38细胞 人胚胎气管组织来源细胞 CCC-HBE-2细胞 人胚肺成纤维细胞 CCC-HPF-1细胞 MRC-5细胞--MRC-5细胞 细胞株 细胞株 人小细胞肺癌细胞 NCI-H209细胞 人低分化肺腺癌细胞 GLC-82细胞 人小细胞肺癌细胞 NCI-H446细胞 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H157细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H520细胞 人肺巨细胞癌高转移细胞株 PG-BE1细胞 人肺巨细胞癌低转移细胞株 PG-LH7细胞 人肺癌细胞 A-427细胞 人低分化肺腺癌细胞 SK-LU-1细胞 人肺支气管癌细胞 NCI-H1650细胞 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H1975细胞 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H2087细胞 人小细胞肺癌细胞 NCI-H2227细胞 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H23细胞 人肺腺鳞癌细胞 NCI-H596细胞 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H838细胞 人肺鳞癌细胞 LTEP-s细胞 人小细胞肺癌细胞 LTEP-sm细胞 人肺鳞癌瘤株 LTEP-s细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H1703细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H2170细胞 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H524细胞 人肺腺癌细胞 SPC-A1细胞 1301细胞,22Rv1细胞,293细胞,293Ad5细胞,293 Cells细胞,293T细胞,293T/17细胞,2BS细胞 ,5637(HTB-9)细胞,6T-CEM细胞,769-P细胞,786-O细胞,95-D细胞,A172细胞,A-204细胞,A2780细胞,A3细胞,A-375细胞,A-427细胞,A-431细胞,A498细胞,A549细胞,A-673细胞,A875 LIFE细胞,AAV-293细胞,ACC-2细胞,ACC-3细胞,ACHN细胞,AE1201细胞,AGS细胞,AN3CA细胞, Anglne细胞,AsPC-1细胞,Bcap-37细胞,BE(2)-M17细胞,BEAS-2B细胞,BEL-7402细胞,BEL-7404细胞,BEL-7405细胞,BeWo细胞,BGC-823细胞,BIU-87细胞,BT-325细胞,BT-474细胞,BT-549细胞,BxPC-3细胞,C-33A细胞,C8166细胞,C918细胞,Ca Ski细胞,CA46细胞,Caco-2细胞,Caki-1细胞,Calu-3细胞,Calu-6细胞,Caov-3细胞
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