: : :tongpaibio －80℃冰箱冻结法
安瓿管或冷冻管的准备 ATCC细胞 传代细胞
将安瓿管或冷冻管按3.4步骤清洗干净，晾干。激光打印标签，标签上标明菌株编号和保藏日期，大小约为10×20mm，标签在管内的位置应距离管底约10mm左右，标签上有字的一面面向管壁。也可直接将菌株编号和保藏日期直接喷码在安瓿管或冷冻管表面，安瓿管表面的喷码要经160℃固定20分钟才能进行灭菌。塞好棉塞或旋上盖子，121℃蒸汽灭菌15～20分钟，60℃烘干备用。 保护剂的准备
选用分析纯甘油制备保护剂。用蒸馏水配制10%的甘油溶液作为保护剂，每支试管分装5mL，121℃蒸汽灭菌15～20分钟。 人结直肠癌细胞，T84细胞
人胃腺癌细胞，BGC-823细胞
人肝癌细胞，HuH-7细胞
人结直肠腺癌细胞，HCT-8细胞
人结直肠腺癌细胞，HT-29细胞
人结直肠腺癌细胞，COLO 205细胞
人十二脂肠腺癌，HuTu-80细胞
人结直肠腺癌细胞，HCT 116细胞
人结直肠腺癌细胞，LoVo细胞
人胰腺腺泡上皮癌，HPAC细胞
人结直肠腺癌细胞，SW620细胞
人胰腺癌细胞，AsPC-1细胞
人胃癌细胞，MKN-45细胞
人胃腺癌细胞，SGC-7901细胞
人胰腺导管癌细胞，CFPAC-1细胞
人食管癌细胞，EC109细胞
人食管癌细胞，NEC细胞
人结肠腺癌细胞，LS 180细胞
人结直肠腺癌瘤株，HCT 116细胞
人结直肠腺癌细胞，COLO 201细胞
人结直肠癌细胞，DiFi细胞
人肝癌细胞，Hep-3B细胞
人肝腹水腺癌细胞，SK-HEP-1细胞
人肝癌细胞，HHCC细胞
人肝癌细胞，HB611细胞
人胃腺癌细胞，AGS细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H838细胞
人肺鳞癌细胞 LTEP-s细胞
人小细胞肺癌细胞 LTEP-sm细胞
人肺鳞癌瘤株 LTEP-s细胞
人肺鳞癌细胞 NCI-H1703细胞
人肺鳞癌细胞 NCI-H2170细胞
人非小细胞肺癌细胞 NCI-H524细胞
人肺腺癌细胞 SPC-A1细胞
人肺癌细胞 A549细胞
人非小细胞肺癌细胞 H125细胞
人肺癌细胞 H1299细胞
人肺癌细胞 TKB-1细胞
人肺腺癌细胞，LTEP-a-2细胞
人肺腺癌细胞，Lu-165细胞
人大细胞肺癌细胞，NCI-H460细胞
人肺腺癌细胞，SPC-A-1细胞
人高转移肺癌细胞，095-D细胞
人肺鳞癌细胞，SK-MES-1细胞
人大细胞肺癌细胞，NCI-H661细胞
人肺黏液上皮样癌细胞，NCI-H292细胞
人肺退行性癌细胞，Calu-6细胞
人肺腺癌细胞，NCI-H1395细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H358细胞
人非小细胞肺癌细胞，HCC827细胞
人典型小细胞肺癌细胞，NCI-H1688细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H1299细胞
人胚肺二倍体细胞，2BS细胞
人支气管上皮样细胞，BEAS-2B细胞
人胚肺成纤维细胞，CCC-HPF-1细胞
人胚胎气管组织来源细胞，CCC-HBE-2细胞
人肺腺癌细胞，Calu-3细胞
人小细胞肺癌细胞，DMS 153细胞
人高转移肺癌细胞，95-D细胞
人低分化肺腺癌细胞，GLC-82细胞
人肺细胞，HLF-a细胞
人胚肺成纤维细胞，CCC-HPF-1细胞
人胚胎气管组织来源细胞，CCC-HBE-2细胞
人肺腺癌细胞，Calu-3细胞
保藏培养物的准备
斜面培养物的制备参照附录A，要求培养至静止期或成熟期。
无菌条件下将灭过菌的10%甘油5mL用无菌吸管注入到培养好的斜面中，用吸管刮取斜面上的菌体，注意不要将培养基刮破。将菌体与保护剂混匀后用吸管注入到安瓿管或冷冻管内，每支分装约0.5～1mL，菌悬液中细胞浓度应不低于106个/mL。 保藏
将安瓿管或冷冻管直接置－80℃冰箱中保藏，可保藏2～5年。
恢复培养
从冰箱中取出安瓿管或冷冻管，立即置于38～40℃水浴中复苏并适当快速摇动，直到内部结冰全部溶解为止。安瓿管复苏所用时间为40～60秒，冷冻管复苏所用时间为60～120秒。
用70%酒精棉球将安瓿管或冷冻管擦拭干净，无菌条件下打开，将菌悬液转移至麦芽汁或其它适宜培养基上，28～30℃或在其适宜温度下培养。
人小细胞肺癌细胞，DMS 153细胞
人高转移肺癌细胞，95-D细胞
人低分化肺腺癌细胞，GLC-82细胞
人肺细胞，HLF-a细胞
人胚肺二倍体细胞，HEL-1细胞
人胚肺二倍体细胞，HEL-2细胞
人肺癌细胞，H1299细胞
人胚肺二倍体细胞，KMB-17细胞
人胚肺细胞系，KuMA细胞
人肺鳞癌细胞，LTEP-s细胞
人小细胞肺癌细胞，LTEP-sm细胞
人肺鳞癌瘤株，LTEP-s细胞
人胚胎心肌组织来源，CCC-HEH-2细胞
人脐静脉内皮细胞，HUV-EC-C细胞
人脐静脉内皮细胞（人膀胱癌细胞污染），ECV-304细胞
人胚胎心脏成纤维样细胞，HEH2细胞
人肝癌细胞，BEL-7402细胞
人胚胎肠粘膜组织来源细胞，CCC-HIE-2细胞
人正常肝细胞，L-02细胞
人胰腺癌细胞，PANC-1细胞
人肝癌细胞，Hep G2细胞
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