流式细胞仪流程： 

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基本操作： 
1:收集细胞：胰酶消化各孔（6孔板），收集到离心管，离心得沉淀； 
2:用PBS打匀，洗1-2遍，离心，沉淀； 
3:沉淀的细胞中加入500uL缓冲液，得悬液； 
4:加5uL AnnexinV-FITC（细胞凋亡检测试剂盒）,混匀； 
5:5uLPI混匀;(4)-(6)三组需要避光操作！ 
6:流式细胞仪测定。（4×105/孔，6孔板，2mL/孔） 若第二天流式测量，可加5—10mL70%乙醇，在4℃固定8h以上。 

人肺腺癌细胞，Lu-165细胞
人大细胞肺癌细胞，NCI-H460细胞
人肺腺癌细胞，SPC-A-1细胞
人高转移肺癌细胞，095-D细胞
人肺鳞癌细胞，SK-MES-1细胞
人大细胞肺癌细胞，NCI-H661细胞
人肺黏液上皮样癌细胞，NCI-H292细胞
人肺退行性癌细胞，Calu-6细胞

MTT溶液的配制：MTT浓度为5 mg/mL，溶于PBS或无酚红的培养基中，用0.22 um滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃避光保存即可。 

注：
在酶标仪检测结果时，为保证实验结果的线性，MTT吸光度在0-0.7范围； 
MTT一般现用现配，过滤后4℃，避光保存2周有效，或保存在-20℃长期保存；避免反复冻融，小剂量分装，用避光袋、锡箔纸包裹；一般把MTT粉分装在EP管，再现用现配，当MTT变为灰绿色时绝不能再用； 

人肺腺癌细胞，NCI-H1395细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H358细胞
人非小细胞肺癌细胞，HCC827细胞
人典型小细胞肺癌细胞，NCI-H1688细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H1299细胞
人胚肺二倍体细胞，2BS细胞
人支气管上皮样细胞，BEAS-2B细胞
MTT致癌，用时带透明薄膜手套。

制备细胞凋亡单染管：
活细胞 
一半活细胞+一半死细胞（高温灭活-水浴90℃）+FITC（染色活Cell） 
一半活细胞+一半死细胞+PI（PI-碘化丙啶染色核酸，但不能穿透细胞膜即染色死Cell） 
一半活细胞+一半死细胞+FITC（碱性环境与抗体蛋白反应，主要是与赖氨酸的氨基与荧光素的硫碳胺键结合，形成FITC-蛋白质结合）+PI PBS的配制：(1000mL)  NaCl 8.0 g 、KCl 0.2 g、 KH2PO4 0.2 g 、Na2HPO4.12H2O 2.9 g 加超纯水至1000mL高压蒸汽灭菌，4℃储存，备用。 细胞器具清洗：  瓶、管等+洁消精（过夜12 h），自来水冲洗25遍，蒸馏水冲1-2遍，蒸馏水泡过夜12 h,烘干，高压蒸汽灭菌（约2 h）,再烘干，至少2-3天，方可用。 

人胚肺成纤维细胞，CCC-HPF-1细胞
人胚胎气管组织来源细胞，CCC-HBE-2细胞
人肺腺癌细胞，Calu-3细胞
人小细胞肺癌细胞，DMS 153细胞
人高转移肺癌细胞，95-D细胞
人低分化肺腺癌细胞，GLC-82细胞
人肺细胞，HLF-a细胞
人胚肺二倍体细胞，HEL-1细胞
人胚肺二倍体细胞，HEL-2细胞
人肺癌细胞，H1299细胞
人胚肺二倍体细胞，KMB-17细胞
人胚肺细胞系，KuMA细胞
人肺鳞癌细胞，LTEP-s细胞
人小细胞肺癌细胞，LTEP-sm细胞
人肺鳞癌瘤株，LTEP-s细胞
人胚胎心肌组织来源，CCC-HEH-2细