正常细胞和肿瘤细胞

更新时间：2015-09-14

浏览次数：1299

正常细胞和肿瘤细胞常规核型标本制备

一、微量全血培养
(一)原理
人体外周血中淋巴细胞是成熟的免疫细胞，正常情况下处于G。期不再增殖。PHA(Phytohemagglutinin，植物血凝素)是人和其它动物淋巴细胞的有丝分裂刺激剂，它能使处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，进入细胞周期开始旺盛的有丝分裂。
人体微量全血培养是一种简单的淋巴细胞培养方法。此法采血量少、操作简便，在 PHA作用下进行短期培养即可获丰富的、有丝分裂活跃的淋巴母细胞，适于制备核型标本。各种因素的效应(如病毒、电离辐射、化学药剂等)也可在淋巴细胞的培养条件下进行观察，从而进行多种在体内无法进行的研究。因此它是细胞生物学及其它学科研究中的一种有效的方法。

正常细胞和肿瘤细胞 (二)操作
1．打开超净台紫外灯20～30分钟。洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台，点燃煤气灯。用75％酒精棉球擦洗手、各种试剂瓶及操作台面，然后将培养液及肝素、秋水仙素、PHA等所需溶液移入超净台。
2．在超净台内将每个培养瓶装入5ml培养液及0.2ml PHA溶液，封好备用。
3．用5ml注射器，7号针头，先吸取少许肝素湿润针筒，然后从肘静脉抽血l～2ml。
每个培养瓶接种全血O．2ml左右轻轻摇动使血和培养液混匀。
4．在培养瓶上标记好供血者姓名、性别、采血日期等，放入培养箱中37℃培养。每天轻轻震荡培养瓶二、三次，防止血球沉积并保证血细胞与培养液充分接触，促进细胞生长繁殖。