A2780细胞

A2780细胞 cDNA文库不同于基因组文库，被克隆DNA是从mRNA反转录来源的DNA。CDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。从而做cDNA克隆时应是先从获得mRNA开始，在此基础上，通过反转录酶作用产生一条与mRNA相互补的DNA链，然后除掉mRNA，以*条DNA链为模板复制出第二条DNA链（双链）；再进一步把此双链插入原核或真核载体。

细胞库细胞种类齐全，上信息发布数量有限，为了能及时快速确认您所需要的细胞是否提供，请*时间细胞库管理员：（，）

A2780细胞  反转录酶催化合成cDNA

1．在置于冰上的无菌微量离心管内混合下列试剂进行cDNA*链的合成：
poly(A)+RNA (1μg/μl)                         10μl
寡核苷酸引物(1μg/μl)                          1μl
1mol/L Tris-HCl (pH8.0, 37℃)                    2.5μl
1mol/L KCl                                    3.5μl
250 mmol/L MgCl2                               2μl
dNTP溶液（含4种dNTP，每种5mmol/L）        10μl
0.1 mol/L DTT                                   2μl
RNase抑制剂（选用）                          25单位
加H2O至                                      48μl
2．当所有反应组在0℃混合后，取出2.5μl反应液转移到另一个0.5ml微量离心管内。在这个小规模反应管中加入0.1μl [α-32P] dCTP（400 Ci/mmol, 10mCi/ml）。
3．大规模和小规模反应管都在37℃温育1h。
4．温育接近结束时，在含有同位素的小规模反应管中加入1μl 0.25mol/L EDTA，然后将反应管转移到冰上。大规模反应管则在70℃温育10 min，然后转移至冰上。
5．参考《分子克隆实验指南》第三版附录8所述方法，测定0.5μl小规模反应物中放射性总活度和可被三（TCA）沉淀的放射性活度。此外，用合适的DNA分子质量参照物通过碱性琼脂糖凝胶电泳对小规模反应产物进行分析是值得的。
6．按下述方法计算cDNA*链的合成量（推算方法略）：
    [掺入的活度值(cpm)/总活度值]×66(μg)=合成的cDNA*链(μg)
7．尽可能快地进行cDNA合成的下一步骤。 

人肺腺癌细胞 SPC-A1细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人肺癌细胞 A549细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人非小细胞肺癌细胞 H125细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人肺癌细胞 H1299细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人肺癌细胞 TKB-1细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人肺腺癌细胞，LTEP-a-2细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人肺腺癌细胞，Lu-165细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人大细胞肺癌细胞，NCI-H460细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人肺腺癌细胞，SPC-A-1细胞 规格（T25培养瓶@密度75%）
人高转移肺癌细胞，095-D细胞（T25培养瓶@密度75%）
人肺鳞癌细胞，SK-MES-1细胞（T25培养瓶@密度75%）
人大细胞肺癌细胞，NCI-H661细胞（T25培养瓶@密度75%）
人肺黏液上皮样癌细胞，NCI-H292细胞 （T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人肺退行性癌细胞，Calu-6细胞（T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人肺腺癌细胞，NCI-H1395细胞（T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H358细胞（T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人非小细胞肺癌细胞，HCC827细胞（T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人典型小细胞肺癌细胞，NCI-H1688细胞（T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H1299细胞（T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人胚肺二倍体细胞，2BS细胞（T25培养瓶@密度75%）细胞说明书 
人支气管上皮样细胞，BEAS-2B细胞
人乳腺癌细胞，Hs 578T细胞  （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，MDA-MB-468-06细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺导管瘤细胞，BT-474细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，HCC1937细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人前列腺癌细胞，PC-3细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，ZR-75-30细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，MCF7细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，BC009细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，BC－020细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，BC－021细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人乳腺癌细胞，BC－022细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人包皮成纤维细胞，HFF细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人羊膜细胞，WISH细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人羊膜细胞，HA细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人胚胎干细胞，E1C4细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人卵巢癌细胞，A2780细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人宫颈癌细胞，H1HeLa细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）
人卵巢癌细胞，Caov-3细胞 （1×T25培养瓶#密度75% 提供技术服务）