EL4细胞小鼠淋巴瘤细胞

更新时间：2015-12-14

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Western Blot常见问题分析

SDS-PAGE电泳：
1、胶不平？凝胶漏液？
a:胶板洗刷干净
b:加入APS和TEMED的量要合适
c:加入试剂后摇匀，使其充分混合，防止部分胶块聚合不均匀
d:温度合适，受热不均匀导致胶聚合不均匀
e:两块玻璃板底部要对齐

F9细胞小鼠畸胎瘤细胞
FaDu细胞人咽鳞癌细胞
FO细胞小鼠骨髓瘤细胞
FRhK-4细胞恒河猴胚肾细胞
GBC-SD细胞人胆囊癌细胞

2、条带比正常的窄？“微笑”或“倒微笑”条带？
a:凝胶聚合不均匀，灌胶时候尽量混合均匀，动作轻缓
b:拔梳子要迅速，清洗加样孔要小心，以免把上样带扭曲
c:样品盐浓度过高会挤压其他条带导致宽窄不一，纯化样品，调整盐浓度
d:胶板底部有气泡会影响电泳效果，应赶走气泡。同时注意电泳槽装置是否合适

EA.hy926细胞人脐静脉细胞融合细胞
EBTr （NBL-4）细胞牛胚气管细胞
Eca-109细胞人食管癌细胞
EL4细胞小鼠淋巴瘤细胞
EL4.IL-2细胞小鼠淋巴瘤细胞
ES-2细胞人卵巢透明细胞癌
F81细胞猫肾细胞

转膜及抗体检测：
1、凝胶肿胀或卷曲？条带歪斜或漂移？单个或多个白点？转膜缓冲液过热？
?可将凝胶在转膜之前放到转膜缓冲液中浸泡5-10min
?电转仪长期使用导致海绵变薄，“三明治”结构不紧凑导致。可在两块海绵之间垫上少许普通的草纸
?确保膜和胶块之间没有气泡
?缓冲液中离子浓度太低，电流或电压太高。转膜过程注意降温

背景太高
原因：
1、膜没有均匀浸湿
2、膜或者缓冲液污染
3、封闭不充分
4、抗体与封闭剂出现交叉反应
5、抗体浓度过高

对策：
1.转膜前用100%甲醇将膜*浸湿
2.拿取膜与吸水纸时要戴手套，更换新鲜转膜缓冲液
3.检测一抗、二抗与封闭剂是否有交叉反应
4.杂交前检测一抗、二抗的工作浓度

Calu-6细胞人退行性癌细胞
CBRH-7919细胞大鼠肝癌细胞
CCD-1095Sk细胞人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞
CEM/C1细胞人急性淋巴细胞白血病细胞
CFPAC-1细胞人胰腺癌细胞
CGM1细胞人EB病毒转化的B细胞
Chang liver细胞人张氏肝细胞
CHL细胞仓鼠肺细胞
CNE细胞人鼻咽癌细胞
COLO 205细胞人结肠癌细胞
COLO 320DM细胞人结直肠腺癌细胞
COLO-320细胞人结肠腺癌细胞
COS-1细胞非洲绿猴SV40转化的肾细胞
COS-7细胞非洲绿猴SV40转化的肾细胞
CRFK细胞猫肾细胞
CT26.WT细胞小鼠结肠癌细胞
CTLA4 Ig-24细胞中国仓鼠卵巢细胞
CTLL-2细胞小鼠T细胞
CW-2细胞人结肠腺癌细胞
Dami细胞人巨核细胞白血病细胞
Daudi细胞人Burkitt's淋巴瘤细胞
DH82细胞狗肾恶性组织细胞增生症细胞
DLD-1细胞人结直肠腺癌上皮细胞
DU 145细胞人前列腺癌细胞

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EL4细胞 小鼠淋巴瘤细胞

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