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SSR分子标记实验 DNA提取过程中的注意事项:
(1) 避免试验材料间DNA的交叉污染或外来DNA的污染。使用冷冻干燥叶片法,可以将每个样品在单独的离心管中研磨,研磨使用的小钢珠球是一次性的,如果是反复使用的小钢珠球,必须*清洗干净使用液氮和研钵研磨叶片组织时,必须在每次研磨前*清理干净研钵和研磨棒。
(2) 试验材料应选取幼嫩组织,因为植物幼嫩组织DNA含量高,且多糖多酚含量少。
(3) 装入离心管的叶片组织不要超过离心管的1/3-1/2,否则会引起细胞裂解不*,导致产量和纯度下降。
BNL CL.2细胞 小鼠胚胎肝细胞
BGC-823细胞 人胃腺癌细胞
Beta-TC-6细胞 小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞
BEL-7405细胞 人肝癌细胞
BEL-7404细胞 人肝癌细胞
BEL-7402细胞 人肝癌细胞
BEAS-2B细胞 人正常肺上皮细胞
Bcap-37细胞 人乳腺癌细胞
B95-8细胞 绒猴EBV转化的白细胞
B16-F10细胞 小鼠皮肤黑色素瘤细胞
(4) 使用液氮研磨时,要先将研钵用液氮冷却,在加入液氮后,要先将叶片压碎,研磨时要快速用力,尽量使样品磨成粉末状。
(5) 水浴前需要确保试管盖盖严,或使用辅助工具进行加固,以防止水浴时因温度较高导致试管盖开裂。
(6) 水浴过程中,每隔10-15min将离心管取出振荡摇匀,使粉碎的叶片组织尽量与裂解液充分接触,破坏细胞结构,释放DNA。
(7) 实验过程中振荡动作不宜剧烈,移液枪头使用大孔枪头,移液动作不能太快,以免使DNA断裂。
AR42J细胞大鼠胰腺外分泌细胞
AsPC-1细胞 人转移胰腺腺癌细胞
AtT-20细胞 小鼠垂体瘤细胞
B16细胞 小鼠黑色素瘤细胞
BxPC-3细胞 人原位胰腺腺癌细胞
BT-549细胞 人乳腺管癌细胞
BT474细胞 人乳腺导管癌细胞
BRL 3A细胞 大鼠肝细胞
BRL细胞 大鼠肝细胞
(8) 当DNA以小球状固体沉积在离心管底部后,倾倒离心管中多余液体时,应避免把DNA小球一起倒出 可在倒去大部分液体后,改用吸水纸吸取剩余液体。
(9) DNA风干在无菌操作台上进行,待乙醇*风干后才能加入TE或ddH2O溶解,如果有残留的乙醇,可能会影响PCR反应的试验结果。
(10) 如果DNA纯度不好,可将粗提物用溶液1×TE充分溶解,离心后,取上清液再次沉淀DNA,可有效除去多糖。
TE-10细胞,人食管癌细胞
TE-1细胞,人食管癌细胞
Tca-8113细胞,人舌鳞癌细胞
T-47D细胞,人乳腺管癌细胞
T24细胞,人膀胱移行细胞癌细胞
WEHI 231细胞,小鼠B 淋巴细胞
WI-38细胞,人胚肺细胞
WISH细胞,人羊膜细胞
Y1细胞,小鼠肾上腺皮质细胞
YAC-1细胞,小鼠淋巴瘤细胞
ZR-75-1细胞,人乳腺癌细胞
ZR-75-30细胞,人乳腺癌细胞
293细胞 人胚肾细胞
293T细胞人胚肾细胞
293T/17细胞 人胚肾细胞
2V6.11细胞 人胚肾细胞
3T3-L1细胞 小鼠胚胎成纤维细胞
4T1细胞 小鼠乳腺癌细胞
5637细胞人膀胱癌细胞
6T-CEM细胞 人T细胞白血病细胞
769-P细胞 人肾细胞腺癌细胞
786-0细胞 人肾透明细胞腺癌细胞
95-D细胞人高转移肺癌细胞
A172细胞人胶质母细胞瘤细胞
A3细胞 人T淋巴细胞白血病细胞
J82细胞人膀胱移行细胞癌
A-431细胞 人表皮癌细胞
A549细胞人非小细胞肺癌细胞
A-673细胞 人横纹肌瘤细胞
A7r5细胞 大鼠胸大动脉平滑肌细胞
A9细胞 小鼠皮下结缔组织细胞
AAV-293细胞 人胚肾细胞
Acc-2细胞人涎腺腺样囊性癌细胞
Acc-3细胞人涎腺腺样囊性癌细胞
ACHN细胞 人肾细胞腺癌细胞
AGS细胞 人胃腺癌细胞
AML-193细胞 人急性单核细胞白血病单核细胞
Ana-1细胞 小鼠巨噬细胞
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