人胚肺转化细胞 SL-1

更新时间：2015-12-28

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动物基因组DNA的提取
实验原理:在EDTA和SDS等去污剂存在下，用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提，可以得到哺乳动构基因组DNA，用此方法得到的DNA长度为100-150 kb，适用于L嘴菌体构建基因组文库和 Southern分析。

通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子质量较大的DNA的琼脂糖凝胶电泳技术。

人胰腺导管癌细胞CFPAC-1
人食管癌细胞EC109
人食管癌细胞NEC
人结肠腺癌细胞LS 180
人结直肠腺癌瘤株HCT 116
人结直肠腺癌细胞COLO 201

试剂
1、1.5 mol／L NaCl
2、0.5 mol／L Tris·HCI pH8.0
3．0.5 mol／L EDTA pH8.0
4．3 mol／L NaAc pH5.2
以上均高压灭菌。
5．蛋白酶K 10mg／mL配好后用一次性过滤器过滤，-20 保存(教师配制)
6.组织匀浆液 100mmol／LNaCI，10mmol／LTris·HCl(pH 8.0)，0.25mmol／LEDTA(pH8.0)
7．酶解液 200mmol／LNaCI，20mmol／L Tris·HCI(pH 8．O)，50mmol／LEDTA(PH 8.0)，200~g／mL蛋白酶K，1％SDS
8．无DNA酵的RNA酶：将胰RNA酶溶解于10mmol／L Tris.HCI(pH7.5)、15 mmol／L NaCl溶液中，浓度l0mg／mL，于100℃水浴处理15min，以降解DNA酶，缓慢冷却到室温，-20℃保存
9．TE缓冲液：10mmol／LTris·HCl(pH8.0)，25 mmol／LEDTA(pH8.0)

人胚肺转化细胞SL-1
人肺腺癌细胞Calu-3
人小细胞肺癌细胞NCI-H209
人低分化肺腺癌细胞GLC-82
人小细胞肺癌细胞NCI-H446
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H157
人肺鳞癌细胞NCI-H520
10．平衡酚(pH8.0)：氧仿：异戊醇=25：24：1<体积比)
11．氧仿：异戊醇=24：l(体积比)
12．5xTBE 5．4gTris，2．75g硼酸 2mL 0.5mol／L EDTA(pH8.0)，加水到100mL；
13．6x上样缓冲液 o．25％溴酚蓝，40％(W／V)蔗糖水溶液
14．λDNA／EcoRI+／HindⅢ 相对分于质量标准物片段(bP)21 227，5148，4 973，4 268，3 530，2 027，1 904，1 584，1 315，947，831，564，125

人胚肺成纤维细胞MRC-5
人胚肺成纤维细胞CCC-HPF-1
人胚胎气管组织来源细胞CCC-HBE-2
人胚胎肺成纤维细胞WI-38
SV-40Z转化肺成纤维细胞WI38/VA13
人胚肺二倍体细胞2BS
人胚肺二倍体细胞KMB-17
人肺细胞HLF-a
人小细胞肺癌细胞DMS 153
人胚肺细胞 VA13细胞WI-38 VA13亚系 2RA
人胚肺二倍体细胞HEL-1
人胚肺细胞系KuMA
人肺转化细胞系AE1201
人肺鳞癌细胞NCI-H226
人胚肺二倍体细胞HEL-2
人支气管上皮样细胞BEAS-2B
人肺巨细胞癌高转移细胞株PG-BE1
人肺巨细胞癌低转移细胞株PG-LH7
人肺癌细胞A-427
人低分化肺腺癌细胞SK-LU-1
人肺支气管癌细胞NCI-H1650
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H1975
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087
人小细胞肺癌细胞NCI-H2227
人非小细胞肺癌细胞NCI-H23
人胚胎心肌组织来源CCC-HEH-2
人脐静脉内皮细胞HUV-EC-C
人脐静脉内皮细胞（人膀胱癌细胞污染）ECV-304
血管平滑肌细胞T/G HA－VSMC
人胚胎心脏成纤维样细胞HEH2
人结直肠腺癌细胞HCT 116
人结直肠腺癌细胞LoVo
人胰腺腺泡上皮癌HPAC
人结直肠腺癌细胞SW620
人胰腺癌细胞AsPC-1
人胃癌细胞MKN-45
人胃腺癌细胞SGC-7901

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