肺癌细胞

更新时间：2015-12-30

浏览次数：1182

基因定点突变
一、定点突变的目的
把目的基因上面的一个碱基换成另外一个碱基。
二、定点突变的原理
通过设计引物，并利用PCR将模板扩增出来，然后去掉模板，剩下来的就是我们的PCR产物，在PCR产物上就已经把这个点变过来了，然后再转化，筛选阳性克隆，再测序确定就行了。
三、引物设计原则
引物设计的一般原则不再重复。
突变引物设计的特殊原则：
（1）通常引物长度为25~45 bp，我们建议引物长度为30~35 bp。一般都是以要突变的碱基为中心，加上两边的一段序列，两边长度至少为11-12 bp。若两边引物太短了，很可能会造成突变实验失败，因为引物至少要11-12个bp才能与模板搭上，而这种突变PCR要求两边都能与引物搭上，所以两边各设至少12个bp，并且合成多一条反向互补的引物。
（2）如果设定的引物长度为30 bp，接下来需要计算引物的Tm值，看是否达到78℃（GC含量应大于40%）。
（3）如果Tm值低于78℃，则适当改变引物的长度以使其Tm值达到78℃（GC含量应大于40%）。
（4）设计上下游引物时确保突变点在引物的中央位置。
（5）使用经过纯化的引物。
Tm值计算公式：Tm=0.41×(% of GC)–675/L+81.5
注：L：引物碱基数；% of GC：引物GC含量。

人胚肺成纤维细胞MRC-5
人胚肺成纤维细胞CCC-HPF-1
人胚胎气管组织来源细胞CCC-HBE-2
人胚胎肺成纤维细胞WI-38
SV-40Z转化肺成纤维细胞WI38/VA13
人胚肺二倍体细胞2BS
人胚肺二倍体细胞KMB-17
人肺细胞HLF-a
人小细胞肺癌细胞DMS 153
人胚肺细胞 VA13细胞WI-38 VA13亚系 2RA
人胚肺二倍体细胞HEL-1
人胚肺细胞系KuMA
人肺转化细胞系AE1201
人肺鳞癌细胞NCI-H226
人胚肺二倍体细胞HEL-2
人支气管上皮样细胞BEAS-2B
人胚肺转化细胞SL-1
人肺腺癌细胞Calu-3
人小细胞肺癌细胞NCI-H209
人低分化肺腺癌细胞GLC-82
人小细胞肺癌细胞NCI-H446
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H157
人肺鳞癌细胞NCI-H520
人肺巨细胞癌高转移细胞株PG-BE1
人肺巨细胞癌低转移细胞株PG-LH7
人A-427
人低分化肺腺癌细胞SK-LU-1
人肺支气管癌细胞NCI-H1650
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H1975
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087
人小细胞NCI-H2227
人非小细胞NCI-H23
人胚胎心肌组织来源CCC-HEH-2
人脐静脉内皮细胞HUV-EC-C
人脐静脉内皮细胞（人膀胱癌细胞污染）ECV-304
血管平滑肌细胞T/G HA－VSMC
人胚胎心脏成纤维样细胞HEH2
人结直肠腺癌细胞HCT 116
人结直肠腺癌细胞LoVo
人胰腺腺泡上皮癌HPAC
人结直肠腺癌细胞SW620
人胰腺癌细胞AsPC-1
人胃癌细胞MKN-45
人胃腺癌细胞SGC-7901
人胰腺导管癌细胞CFPAC-1
人食管癌细胞EC109
人食管癌细胞NEC
人结肠腺癌细胞LS 180
人结直肠腺癌瘤株HCT 116
人结直肠腺癌细胞COLO 201

细胞库细胞种类齐全，上信息发布数量有限，为了能及时快速确认您所需要的细胞是否提供，请*时间细胞库管理员：（，）