U14细胞（小鼠U14细胞）

更新时间：2017-06-12

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U14细胞（小鼠U14细胞）

通派细胞库作为国内专业培养细胞中心，供应：肝癌细胞、直肠癌细胞、胚肾细胞、肺癌细胞、肝细胞、静脉内皮细胞、鼻咽癌细胞、巨噬细胞等。

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贴壁细胞操作流程：（贴壁细胞生长缓慢）

1）适当提高血清浓度（zui高不能超过20%）。

2）根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养。

贴壁细胞操作流程：（生长不均）

贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养

U14细胞（小鼠U14细胞） 细胞包装：

复苏细胞（T25培养瓶×1 常温运输）

冻存细胞（冻存管、干冰包装低温运输）

新闻：

采用RT-PCR方法从人外周血白细胞总RNA中钓取人可溶性b淋巴细胞刺激因子的cDNA片段, 再运用基因重组手段, 利用通用型质粒pBV220构建表达载体pBV220/hsBLyS.

经测序鉴定后, 以之为模板使用重叠PCR法扩增得到hsBLyS的两个点突变体hsBY-A(Cys146→Ala146) 和hsBY-V (Cys146→Val146)的基因片段, 构建表达载体pBV220/hsBY-A及pBV220/hsBY-V.

经测序无误后, 将上述3种载体分别转化大肠杆菌DH5α并诱导重组蛋白质表达, 薄层扫描结果显示3种蛋白质在DH5α中表达量都在20%～30%之间.

再分别运用变性、凝胶过滤层析及复性等手段纯化目的蛋白质, zui后通过B淋巴细胞增殖实验检测纯化产物促人B细胞增殖的活性.

实验结果表明, 3种重组蛋白质都能明显刺激人B细胞增殖;

统计学检验显示, 突变体rhsBY-V较野生型rhsBLyS的促人B淋巴细胞增殖活性显著增强.

U14细胞（小鼠U14细胞）