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PC12细胞株来源 如何养好大鼠肾上腺细胞
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无菌操作工作区域注意事项:(更多细胞细节问题可直接咨询细胞库管理员;)
保持清洁及宽敞,必要物品,例:试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。(网络信息仅供参考,细胞无菌操作很重要,细胞污染预防等问题可咨询通派细胞库管理员,获取准确的细胞信息) 实验用品擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
控制细胞分解葡萄糖(Glucose)的两个蛋白质对干细胞的形成非常重要。向基因组中插入了四个蛋白质的基因,使成熟的人类细胞转变成了类早期干细胞的状态,这一技术称为细胞重编程(Reprogramming)。
(大鼠C6细胞 来源:通派细胞库 大鼠胶质瘤细胞)
重编程后的细胞有发育成任意类型细胞的能力,称为细胞的多能性。人们一直希望由人类成熟细胞转化成的多能干细胞有朝一日能生成新的组织或器官,用以修复或替代人类的损伤组织或患病组织。
(大鼠RSC96细胞 来源:通派细胞库 大鼠雪旺细胞)
细胞重编程过程中,它会关闭由葡萄糖产生能量的新陈代谢通路,该通路发生在有氧条件下的线粒体,继而启用无氧条件下的糖酵解通路。
(小鼠Ana-1细胞 来源:通派细胞库 小鼠巨噬细胞)
能量产生通路的转变对胚胎细胞和组织干细胞很重要,因为它们必须在低氧环境下生存。研究通过对缺氧诱导因子1α和2α(Hypoxia-induced factor 1α and 2α,HIF1α和HIF2α)的功能缺失分析。
(人U-2 OS细胞 来源:通派细胞库 人骨肉瘤细胞)
研究发现这两种蛋白质对细胞重编程产生干细胞是必需的,会调控一些下游基因显著改变细胞行为。为了更详细地了解HIF1α和HIF2α对细胞的影响,分别激活其中一种,发现当HIF1α单独被激活时,细胞进入糖酵解通路,由此产生更多的诱导型多能干细胞。
(小鼠MFC细胞 来源:通派细胞库 小鼠胃癌细胞)
然而单独激活HIF2α时,细胞不会转化为干细胞。如果同时激活HIF1α和HIF2α,HIF2α会胜出,阻断干细胞的形成。深入挖掘发现HIF2α在细胞重编程初期的确能促进细胞向糖酵解通路转换;
(小鼠RM-1细胞 来源:通派细胞库 小鼠前列腺癌细胞)
但当该过程持续时间太长时,HIF2α能上调肿瘤坏死因子相关的诱导凋亡配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的表达,该配体会诱导干细胞凋亡,阻断干细胞的产生。因而,HIF2α既能促进细胞多能性,也能抑制细胞多能性,这取决于细胞重编程的不同时期。
(人U87 MG细胞 来源:通派细胞库 人脑星形胶质母细胞)
这一发现有助于干细胞研究。首先,可以用HIF1α大量产生干细胞。其次,可以单独用HIF蛋白质或结合其他的刺激因子诱导产生干细胞,并淘汰插入基因阻断细胞重编程这种方法。
(猴RF/6A细胞 来源:通派细胞库 猴脉络丛视网膜内皮细胞)
该发现也有助于癌症研究,HIF1α和HIF2α是正常细胞转化为癌细胞的重要因子,事实上,活性HIF1α的存在是入侵性疾病的标记。研究人员指出,可以通过在恶性肿瘤细胞早期阻断HIF1α的表达,或者在后期刺激HIF2α的表达来阻断肿瘤生长。
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