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C6细胞培养注意事项 大鼠胶质瘤细胞实验
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细胞培养:研究人员在冻存细胞的培养时出现细胞数目太少, 大都是因为离心过程操作上的失误, 造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。(网络信息仅供参考,冻存细胞解冻、细胞复苏等疑问可咨询通派细胞库管理员,获取准确的细胞信息) 建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔天后再更换培养基即可。
如何挽救线粒体发生功能障碍细胞;
为了发现可挽救这些细胞的遗传突变,Chen和Birsoy在白头研究所前任研究人员Thijn Brummelkamp开发的一个单倍体遗传系统中,模仿线粒体功能障碍。他们用抗霉素(antimycin)抑制线粒体功能后,发现ATPIF1基因钝化的突变细胞可免于线粒体功能丧失。
(人RD细胞 来源:通派细胞库 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞)
atp酶抑制因子ATPIF1,是一个备份系统的一部分,可拯救饥饿的细胞。当细胞丧失氧气和糖分时,平时生产ATP的一个线粒体复合物(称为ATP合成酶),会转变成消耗ATP,这种状态对于一个已经饥饿的细胞可能是有害的。
(人TE671细胞 来源:通派细胞库 人横纹肌瘤细胞)
ATPIF1可与ATP合成酶相互作用,来关闭ATP合成酶,并阻止它消耗线粒体的ATP供应,在这个过程中,线粒体膜电位也变得更坏。
(猴B95-8细胞 来源:通派细胞库 绒猴EBV转化的白细胞)
在这些线粒体功能障碍疾病中,某种意义上,这种状态对于细胞是一种虚假的饥饿状态——其实有充足的养分,但是因为线粒体正常功能被阻断,线粒体就表现的好像没有足够的氧气一样。
(人HC-A细胞 来源:通派细胞库 人软骨细胞)
所以在这些情况下,激活ATPIF1并不好,因为周围还有许多营养可提供ATP。相反,阻断ATPIF1则具有治疗性,因为这能够使膜电位得以维持。
(小鼠F9细胞 来源:通派细胞库 小鼠畸胎瘤细胞)
具有严重线粒体疾病的患者其肝细胞经常受到影响,所以Chen和Birsoy检测了线粒体功能障碍在对照小鼠和ATPIF1敲除小鼠肝细胞中的影响。与具有正常ATPIF1活性的肝细胞相比,具有ATPIF1抑制功能的肝细胞,再次更好地应对了线粒体功能障碍。
(人KP-N-NS细胞 来源:通派细胞库 人肾上腺神经母细胞瘤细胞)
如果你摆脱了ATPIF1,你就会在线粒体功能障碍存在的情况下存活。根据目前为止我们所观察到的结果,在小鼠中阻断ATPIF1并没有严重的副作用。
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