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67NR细胞培养流程
点击次数:409 更新时间:2023-11-21

细胞:67NR细胞

中文名称:小鼠乳腺癌细胞

生长特性:贴壁细胞

培养基:1640培养基(GIBCO) 血清:10% 胎牛血清(GIBCO)

细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)

1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)

2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。

3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。

 

特别注意:(信息针对网络宣传,仅供参考;建议直接咨询细胞管理员)

1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化,将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。


成年生物体内有多种体细胞,例如血液细胞、肌肉细胞、免疫细胞和神经细胞等等,它们形态各异,具有不同的功能。干细胞则是未成熟的细胞,可发育成为体细胞。 

如果把体细胞比喻成具有一技之长的“专门人才"。

干细胞:可以通过学习发展成才的“潜在人才",可以分化成体细胞。分化一旦完成,体细胞的“职业"就确定了。 

胚胎干细胞:具有广泛的发展潜力,可以分化成所有不同种类的体细胞。就像刚出生的婴儿,虽然没有任何专门才能,但未来有着无限的可能,长大后具体成为什么领域的人才取决于培养过程。 

由于胚胎干细胞是“全功能"的干细胞,仅从技术角度来说,用胚胎干细胞来培养人体组织和器官以治疗疾病是理想的。但胚胎干细胞要从胚胎中提取,因此进行得不太顺利。 

成年动物体内也拥有一些干细胞,称为成体干细胞。它们具有一定的分化潜力,但分化方向比较固定,比如造血干细胞通常只发展成血液细胞。成体干细胞就像已经接受过大量专业训练的学生,一般只会发展成特定领域的人才。 

成体干细胞其分化能力有限。虽然曾成功改变成体干细胞的分化方向,但总的来说,“跨专业发展"对成体干细胞是相当困难的。 

以往认为,细胞的克隆潜力与其分化潜力有关,胚胎干细胞克隆潜力最高,体细胞低,而成体干细胞介乎两者中间。用分化的体细胞克隆出小鼠,同时也证明了体细胞克隆潜力比成体干细胞更高,这一成果对于克隆和干细胞研究有重要意义。

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