CEK细胞常规培养

更新时间：2023-11-23

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细胞：CEK细胞

中文名称：鸡胚肾细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：DMEM-H培养基血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

网织红细胞膜剪切弹性模量和表面粘度的研究

用苯肼使动物造成急性溶血性贫血的方法,诱发动物体内同步生长的网织红细胞.

用一种测量红细胞膜剪切弹性模量及表面粘度的新方法--新型激光衍射法,连续72h监测经过不同发育阶段的网织红细胞的小变形指数(DI)d和变形恢复过程(即松弛过程)中变形恢复到最大值(DI)max一半的时间t0.5(即变形恢复半时间)

将测得的结果分别代入红细胞膜的剪切弹性模量(E)公式和表面粘度(μm)公式.

计算出不同发育阶段的网织红细胞的膜剪切弹性模量和表面粘度,发现网织红细胞在转变为成熟红细胞的过程中,其膜剪切弹性模量和表面粘度有明显改变.

这对研究由于贫血等原因造成的网织红细胞增多情况下,全血的微观流变学特性有重要的临床意义.

同时对网织红细胞在转化过程中膜的剪切弹性模量和表面粘度的变化规律加以系统研究,填补网织红细胞研究方面的空白。

贴壁细胞签收操作：

1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）

2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。

细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）

1．吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2．镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3．取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4．注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。