H1688细胞常规培养说明（人小细胞肺癌细胞）

更新时间：2023-11-28

浏览次数：401

细胞：H1688细胞

中文名称：人小细胞肺癌细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640培养基血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

荧光株：H1688-RFP荧光标记细胞株 H1688-GFP荧光标记细胞株 H1688-LUC荧光标记细胞株

耐药株：H1688-DDP耐药株 H1688-PTX耐药株 H1688-ADM耐药株

细胞检测服务：H1688细胞鉴定（细胞检测技术服务可直接咨询客服）

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

ADV核酸检测实验:

1.（标本预处理）血清、血浆等液体标本：吸取液体标本100ul至新的洁净的1.5ml离心管，加入100ul核酸提取液A，13,000rpm离心3min，去上清保留约50ul沉淀。

2.（标本预处理）肝、脾、淋巴结等组织：用适量灭菌生理盐水清洗送检的组织的血液；取大约100mg的组织，加入1ml的灭菌生理盐水用匀浆研磨成组织浆，移至新的1.5ml离心管，13,000rpm离心5min，去上清留沉淀；

DNA提取：向上述标本中加入50μl核酸提取液B充分混匀，100℃烈解10min。13,000rpm 离心3min，备用。

阴性质控品：取50ul阴性质控品，加50ul核酸提取液B充分混匀(提取液用前需室温溶解并充分混匀)后100℃10分钟，13,000rpm离心3分钟，取上清液4ul做PCR反应。

ADV阳性质控品：直接取4ul进行PCR扩增，或按照PCR扩增介绍方法进行定量分析。

PCR扩增:

从试剂盒中取出ADV–PCR MIX、Taq酶系，室温融化并振荡混匀后，10,000rpm离心10s。

设所需要的PCR反应管管数为N（N=样本数+1管阴性对照+4管阳性对照），每个测试反应体系配制如下表：

试剂:ADV–PCR MIX 用量:24μl

试剂:Taq酶系用量:2μl

贴壁细胞签收操作：

1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）

2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养血清注意事项请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）

1．吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2．镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3．取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4．注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。