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H1688细胞常规培养说明(人小细胞肺癌细胞)
点击次数:361 更新时间:2023-11-28

细胞:H1688细胞

中文名称:人小细胞肺癌细胞

生长特性:贴壁细胞

培养基:1640培养基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)

荧光株:H1688-RFP荧光标记细胞株  H1688-GFP荧光标记细胞株 H1688-LUC荧光标记细胞株

耐药株:H1688-DDP耐药株  H1688-PTX耐药株  H1688-ADM耐药株

细胞检测服务:H1688细胞鉴定(细胞检测技术服务可直接咨询客服)

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)


ADV核酸检测实验:

1.(标本预处理)血清、血浆等液体标本:吸取液体标本100ul至新的洁净的1.5ml离心管,加入100ul核酸提取液A,13,000rpm离心3min,去上清保留约50ul沉淀。

2.(标本预处理)肝、脾、淋巴结等组织:用适量灭菌生理盐水清洗送检的组织的血液;取大约100mg的组织,加入1ml的灭菌生理盐水用匀浆研磨成组织浆,移至新的1.5ml离心管,13,000rpm离心5min,去上清留沉淀;

DNA提取:向上述标本中加入50μl核酸提取液B充分混匀,100℃烈解10min。13,000rpm 离心3min,备用。

阴性质控品:取50ul阴性质控品,加50ul核酸提取液B充分混匀(提取液用前需室温溶解并充分混匀)后100℃10分钟,13,000rpm离心3分钟,取上清液4ul做PCR反应。

ADV阳性质控品:直接取4ul进行PCR扩增,或按照PCR扩增介绍方法进行定量分析。

PCR扩增:

从试剂盒中取出ADV–PCR MIX、Taq酶系,室温融化并振荡混匀后,10,000rpm离心10s。

设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+4管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:

试剂:ADV–PCR MIX  用量:24μl

试剂:Taq酶系  用量:2μl


贴壁细胞签收操作

1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化,将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养血清注意事项请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)


细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)

1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)

2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。

3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。


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