细胞:H1944细胞 中文名称:人非小细胞肺癌细胞 生长特性:贴壁细胞 培养基:1640培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清) (网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;) 细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作) 1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min) 2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。 3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。 4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。
支气管炎病毒(AIBV)核酸检测:
实验目的:实验用于检测动物体液、咽或泄殖腔试子或肺脏、肾脏、淋巴结等组织标本以及细胞培养液中禽传染性支气管炎病毒(AIBV)RNA; 实验原理:选取一对禽传染性支气管炎病毒(AIBV)特异性引物和一条特异性荧光探针,应用Trizol提取RNA,经逆转录酶作用将RNA转录成cDNA,后者在Taq酶作用下,配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分,用一步PCR荧光探针法对禽传染性支气管炎病毒(AIBV) RNA进行扩增,从而达到快速检测之目的。 适用实验标本:动物体液、咽或泄殖腔试子或肺脏、淋巴结等组织标本;病毒细胞培养液。
实验标本采集: 组织:取发病动物肺、肝、脾、肺、肾、淋巴结及胰腺等组织约1g,置入1.5ml洁净EP管。 体液及培养液体:取上述标本约1ml,置入1.5ml洁净EP管。 咽及泄殖腔等试子:用棉试子取咽或泄殖腔分泌物,将试子放入盛有1.0ml PBS(或生理盐水)的离心管中。
|