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细胞:OCCM-30细胞
中文名称:小鼠成牙骨质细胞
生长特性:贴壁
培养基:DMEM-H培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
细胞有丝分裂是生命的一个关键过程。有丝分裂中的错误会造成不育和智障,也可能导致癌症。
研究人员知道蛋白激酶在分裂中起重要作用,但是还不清楚这些酶如何促成细胞中的一些重要的变化从而使细胞发生分裂。
为了能更全面地了解细胞分裂,研究人员将系统地寻找所有分裂所需的基因,然后检测它们的产物,以此研究有丝分裂激酶是如何调节这些蛋白的。
这个研究项目对理解这个生命最基础的过程至关重要——一个细胞如何变成两个细胞。我们将逐个抑制人类活细胞中的基因并测定抑制后细胞是否还能分裂,以此找到有丝分裂所需的基因。
为了达到这个目的,研究人员使用了“RNA干扰"的方法——利用小分子RNA靶向特定的与有丝分裂有关的基因并使其沉默。
大约有20,000个基因将被逐个抑制,研究人员用精密显微镜来拍下细胞分裂过程的动态画面——研究人员将会拍下每组细胞在48小时内的变化情况,用于捕捉沉默特定基因的整个影响——预期需要记录数以十万计的动画。
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