HGF细胞传代（人牙龈成纤维细胞）

更新时间：2024-01-09

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细胞：HGF细胞

中文名称：人牙龈成纤维细胞

生长特性：贴壁

培养基：DMEM-H培养基血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

HGF细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

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植入人体细胞的某种酵母的转移RNA（核糖核酸）能够进入人体细胞线粒体并影响线粒体蛋白的合成，从而可能改变线粒体部分功能。这一发现有助于研究新方法治疗由线粒体工作异常引起的神经、肌肉疾病。

如果人体细胞内的线粒体转移RNA发生基因点突变，造成线粒体无法正常工作，就可能导致线粒体较集中、肌肉和神经发达且耗能多的人体器官工作受影响，产生某些严重疾病。

如果能将来自外部的转移RNA植入某些病人的细胞并修复线粒体的部分功能，则可能达到治疗疾病的目的。专家联合进行的实验正是基于这一构想而进行的。

对酵母转移RNA进行研究发现了帮助转移RNA进入线粒体的特殊结构。在此基础上，将某种酵母赖氨酸转移RNA植入单个人体细胞。结果，被植入的转移RNA成功进入了人体细胞线粒体内部。

研究结果:人体细胞线粒体内部合成的蛋白含有了被酵母赖氨酸转移RNA带入的氨基酸。这表明，被植入人体细胞的转移RNA可能会改变人体细胞线粒体的部分功能。

这项研究的进展目前离活体动物模型实验尚远。但是，来自外部的转移RNA可能改变人体细胞线粒体部分功能这一发现表明，人们可尝试开发基因疗法，治疗由线粒体转移ＲＮＡ发生基因点突变引起的人体疾病。