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FRhK-4细胞传代(恒河猴胚肾细胞)

更新时间:2024-02-02      浏览次数:325

细胞:FRhK-4细胞

中文名称:恒河猴胚肾细胞

生长特性:贴壁

培养基:DMEM-H培养基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

FRhK-4细胞传代

1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。

2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。

3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

 

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

研究发现了一套能够使成体造血干细胞处于原始状态的“主控开关"。这些开关密码的破译可能使研究人员在将来能够培养用于癌症和其它骨髓疾病患者移植的新血细胞。

研究人员不是在基因水平上定位出这种控制开关,而是在最近新发现的核酸水平的蛋白质生产形式上,即RNA水平。

MicroRNA分子曾经被认为是细胞的垃圾,但是现在已经知道它是关闭较大的RNA链的蛋白质装配。

干细胞能够制造对分化成血细胞至关重要的蛋白质,但是microRNA将它们封在了原地。

为了中止蛋白质的装配,microRNA与相配的全长RNA配对,然后折叠并扭曲,从而使这个较长的RNA报废。但是RNA的配对不是的,并且一个microRNA能够抓住几百个RNA链,从而高效控制数百个RNA。

研究人员一直在寻找确定出这些microRNA开关的方法,从而控制干细胞长成新的血细胞的时间。

为了确定出关键的microRNA,研究人员利用一种专门的计算机软件筛选了数千个RNA片断。

筛选结果显示,一套由33种microRNA构成的核心开关能够与超过1200种较大的不同的RNA相配对,已经知道这些较大的RNA对干细胞的成熟非常重要。

目前,研究人员正在利用一种非增殖病毒将33个microRNA的遗传指令分别插入成体干细胞,从而检测这些配对预测数据是否正确。

然后,他们将会在培养皿中培养这些细胞。第一个进行检测的是microRNA-155已经被证实能够终止干细胞发育成红血球和白血球。

和期望的一样,没有microRNA-155的干细胞成熟了,而携带microRNA-155的干细胞则很少能成熟为红血球和白细胞。


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