细胞：GC-1 spg细胞 中文名称：小鼠精原细胞 生长特性：贴壁 培养基：DMEM-H培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO GC-1 spg细胞传代： 1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。 2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时； （可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化） 直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。 3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 胸膜肺炎放线杆菌(APP)核酸扩增检测 实验目的：用于检测发病动物肺脏、淋巴结等组织或痰液以及培养液等标本中胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA，适用于胸膜肺炎放线杆菌(APP)感染引起的传染性胸膜肺炎辅助诊断及流行病学调查。其检测结果仅供参考。 实验原理：选取一对胸膜肺炎放线杆菌(APP)特异性引物和一条特异性荧光探针，应用碱裂解法裂解提取DNA，后者在Taq酶作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR-荧光探针法对胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA进行扩增，从而达到实时快速定量检测之目的。 实验组成： 核酸提取液B（4管 500μl/管） Taq酶系（1管/80μl/管） APP-PCR MIX（1管 960μl/管） APP阳性质控品（1管 50μl/管(1×107Ccopies/ml)） 阴性质控品（1管 500μl/管） 适用标本类型：发病动物肺脏、淋巴结等组织或痰液以及培养液等标本。 标本采集： 发病动物肺脏、淋巴结等组织标本：无菌条件下取上述组织1g左右，置入1.5ml洁净EP管，立即送检。 痰液、体液及培养液：取上述标本约1ml，置入1.5ml洁净EP管，立即送检。 标本保存、运输： 标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
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