细胞:H1437细胞 中文名称:人肺腺癌细胞 生长特性:贴壁 培养基:1640培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清) 冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO H1437细胞传代: 1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。 2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时; (可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化) 直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。 3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。 4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;) 非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测(PCR-荧光探针法) 实验目的:适用于检测猪血清、肺、脾、肾、肠系膜及额下淋巴结等组织标本或病毒培养液中非洲猪瘟病毒(ASFV)DNA,适用于猪瘟病毒感染的辅助诊断及流行病学调查。其检测结果仅供参考。 实验原理:用一对非洲猪瘟病毒(ASFV)特异性引物和一条特异性荧光探针,应用碱裂解法裂解提取DNA,后者在Taq酶作用下,配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分; 通过PCR-荧光探针法对非洲猪瘟病毒(ASFV)DNA进行扩增,从而达到实时快速定量检测之目的。 实验试剂: (核酸提取液B 4管 500μl/管)(Taq酶系1管 80μl/管)(ASFV –PCR MIX1管 960μl/管) (ASFV阳性质控品1管 50μl/管(1×10P7PCopies/ml))(阴性质控品 1管 500μl/管) 实验标本类型:猪血清、肺、脾、肾、肠系膜及额下淋巴结等组织标本或病毒培养液等。
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