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细胞:HPDE6-C7细胞
中文名称:人正常胰腺导管上皮细胞系
生长特性:贴壁
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。
HPDE6-C7细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;
(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
控制机体上皮细胞形状和运动状态发生转变的关键机制,名为ASPP2的肿瘤抑制蛋白的功能就好比是一种分子开关,其可以控制并且逆转机体上皮细胞的形状及运动状态的改变,这对于解释一系列生化现象,比如伤口愈合、胚胎发育及癌症转移都非常关键。
鉴别出控制控制上皮细胞可塑性的分子开关,这样的可塑性是癌症的标志,为了发生转移,癌细胞会疏松自身的结构,不断摆动脱离母体肿瘤组织,[人HCC38细胞 来源:通派细胞库 人乳导管癌细胞]进而在机体其它组织器官部位“安家",上述的过程就称为上皮细胞向间充质细胞的转分化过程及间质细胞向上皮细胞的转化过程(EMT及MET)。
(人H1339细胞 来源:通派细胞库 人小细胞肺癌细胞)
研究发现,在肾小管的发育过程中ASPP2蛋白会促使MET过程的发生,从而过滤掉机体血液中的废弃物,而当ASPP2蛋白缺失时会促进EMT过程的发生,尤其是在表达常见癌症基因RAS细胞中,EMT过程尤为明显,从而就会引发癌症发生转移。(人HK-2细胞 来源:通派细胞库 人肾小管上皮细胞)
随后研究人员对小鼠模型进行试验发现,当小鼠机体中乳癌细胞表达较低水平的ASPP2时,其就会大量转移至大脑细胞中,如果这些乳癌细胞表达较足量的ASPP2,其转移的能力就会明显下降。(人LS180细胞 来源:通派细胞库 人结肠腺癌细胞)
对从病人机体分离的肝脏及乳肿瘤组织进行分析,研究者发现,癌症中ASPP2表达的欠缺和病人较低的生存率直接相关;
蛋白ASPP2可以通过和E-钙粘蛋白及β-连环蛋白的关联来控制MET和EMT过程。(人Colo201细胞 来源:通派细胞库 人结直肠腺癌细胞 )
最后研究者Lu表示,近些年来我们已经对驱动EMT的过程研究地非常多了,但是对于MET过程的发生却知之甚少,而MET过程对于机体的健康及癌症的转移又至关重要,鉴别出了MET的诱导子及守护者,这对于开发治疗癌症的新型靶向疗法提供了新的研究思路和依据。(人NS-3细胞 来源:通派细胞库 人胃癌细胞)
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