BEL-7404细胞 (人肝癌细胞传代)

更新时间：2024-09-08

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细胞：BEL-7404细胞

中文名称：人肝癌细胞

生长特性：贴壁细胞

BEL-7404细胞培养基：1640 培养基血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

BEL-7404细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

马流感病毒通用型(EIV)核酸扩增检测

实验目的：

适用于检测发病动物鼻孔脓性分泌物、鼻粘膜试子及尸检动物肺脏、淋巴结等组织以及细胞培养液中马流感病毒(EIV)RNA，适用于马流感病毒(EIV)感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

实验原理：

选取一对马流感病毒(EIV)H3N8型及其近似株特异性引物和一条特异性荧光探针，应用Trizol提取RNA，经逆转录酶作用将RNA转录成cDNA，后者在Taq酶作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，用PCR-体外扩增法对马流感病毒RNA进行扩增，从而达到快速检测之目的。

实验组成：

（RNA提取液B、1管、500μl/管）（逆转录酶系、1管、40μl/管）

（Taq酶系、1管、40μl/管）（EIV PCR MIX、1管、800μl/管）（EIV 阳性质控品、1管、50μl/管）

（阴性质控品、1管、500μl/管)(DEPC水、1管、2000μl/管）

质控标准：

阴性质控品：全部阴性。

EIV阳性质控品：阳性质控品的 Ct 值均应小于 30，且呈标准S型扩增曲线。

以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效，全部试验应重新进行。

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