BT20细胞 (人乳腺癌细胞传代)

更新时间：2024-09-09

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细胞：BT20细胞

中文名称：人乳腺癌细胞

生长特性：贴壁细胞

BT20细胞培养基：1640 培养基血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

BT20细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

猪脑心肌炎病毒(EMCV)核酸扩增检测

实验目的：用于检测猪血清、脑、心肌以及淋巴结等组织标本或病毒培养液中猪脑心肌炎病毒(EMCV)mRNA，适用于猪脑心肌炎病毒感染的辅助诊断及流行病学调查。其检测结果仅供参考。

实验原理：选取一对猪脑心肌炎病毒特异性引物结合一条特异性荧光探针，采用Trizol提取猪脑心肌炎病毒RNA，经过逆转录作用生成cDNA，后者在耐热DNA聚合酶(Taq酶)作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分，通过一步PCR-荧光探针体外扩增法对猪脑心肌炎病毒RNA进行扩增，从而达到快速实时定量检测之目的。

实验组成：（RNA提取液B、1管、500μl/管）（逆转录酶系、1管、40μl/管）（EMCV–RT MIX、1管、140μl/管）

（Taq 酶系、1管、80μl/管）（EMCV–PCR MIX、1管、960μl/管）（DEPC水、1管、2000μl/管）

（EMCV 阳性质控品、1管、50μl/管(1×107 Copies/ml)）（阴性质控品、1管、500μl/管）

备注: RNA提取液A（Trizol reagents）等另行配备。

适用标本类型：猪血清、脑、心肌以及淋巴结等组织标本或病毒培养液等。

标本保存和运输：上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。

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