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细胞:Calu-1细胞
中文名称:人肺癌细胞
生长特性:贴壁细胞
Calu-1细胞培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
Calu-1细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
脑是一个复杂的系统。在胚胎发育过程中,大量的神经细胞是依靠什么样的机制来协调它们的运动迁移并排列组合成有序的组织结构,一直吸引着研究者们浓厚的兴趣。
发现高度极性的神经细胞在定向迁移过程中,需要一种长距离的细胞内信号传递过程,协调神经细胞的不同部位对外界导向信号的反应。(CCLP1细胞培养条件:90%高糖DMEM、10%胎牛血清、贴壁细胞)
他们观察到,迁移神经细胞前方的生长锥是前方信号的部位,在自发迁移的神经细胞前方遭遇排斥性的神经导向因子Slit时会发生显著的躲避反应——生长锥首先 “撤退",然后胞体停止前进,并调转方向,最终细胞朝相反方向逃逸而去。
在这个过程中,会发生一个长距离的细胞内钙波“通讯",首先是Slit在生长锥内“点燃"钙离子“烽火",紧接着是钙离子“烽火"从生长锥传递到后方的胞体,通知胞体前方的“敌情",进而通过调节胞体部位的一种小分子GTP酶RhoA的活性和分布,使细胞体掉头向后“撤退"。(CCRF-CEM细胞培养条件:90% RIMP1640、Penicillin/Streptomycin、10% 胎牛血清、悬浮细胞、人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞)
正是这个钙波信号协调了运动中的神经细胞各部分对外界排斥性因子Slit的逃避反应。目前已知多种发育性神经系统疾病是由于神经细胞迁移紊乱造成的,患者常表现出智障、癫痫等症状。
因此,对神经细胞迁移导向基本机制的研究将有利于人们对这类发育性神经系统疾病的认识和防治。
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