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细胞:CAOV-3细胞
中文名称:人乳头状卵巢腺癌细胞
生长特性:贴壁细胞
CAOV-3细胞培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
CAOV-3细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
Nocturnin的基因,它编码的蛋白质存在于哺乳动物多种身体组织(包括肝脏)中。当生物钟基因Nocturnin在老鼠体内失活的时候,即使对它们喂以高脂肪的食料,它们也不会胖起来。
我们有证据表明生物钟本身在变异的老鼠体内发挥着正常的作用,但是油脂和葡萄糖代谢的很多方面都紊乱了。
研究人员破坏了一组老鼠的Nocturnin基因,然后对其中的一些老鼠喂以标准的食料,同时对另外的老鼠喂以高脂肪的食料。(CEC细胞培养条件:90%高糖DMEM、10% 胎牛血清、贴壁细胞)
对正常的老鼠喂以标准的食料后,它们在外形上和行为上都跟正常的老鼠无甚差别。它们看起来小巧玲珑,在轮子上不停地窜来窜去,并且在一天的同一时间内一直保持着活跃。
体内缺乏Nocturnin基因的老鼠在喂以高脂肪食物后,体重只有轻微的增加。而当正常的老鼠在喂以高脂肪食物后,体重暴涨到了缺乏Nocturnin老鼠的两倍。另外,野生的老鼠在它们的肝脏周围聚集了大量的脂肪,而缺乏Nocturnin基因的老鼠则没有。
如果你只关注于肥胖的话,那么没有这个基因对它们来说挺不错,但是,变异的老鼠在正常食料的喂养下也改变了葡萄糖代谢。
很可能是Nocturnin,这种产生于多种组织(包括肝脏、肥大细胞、胰腺、内脏)的蛋白,对于油脂和葡萄糖代谢存在着多个层面上的影响。(CEF细胞培养条件:90%高糖DMEM、10% 胎牛血清、贴壁细胞、鸡成纤维细胞)
这种影响触发了对胰腺分泌胰岛素的阻抗,而胰岛素的功能在于将血液中的葡萄糖转运至单独的细胞中并转化为能量。胰岛素分泌量低或者有分泌阻抗的人易患II型糖尿病。
研究小组将继续研究Nocturnin基因的分子作用机制,不仅仅是在肝脏中,也将在其它产生蛋白质的身体组织中,比如眼睛、大脑和肾脏。
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