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Daoy细胞传代 人髓母细胞瘤细胞

更新时间:2024-09-11      浏览次数:279

细胞:Daoy细胞

中文名称:人髓母细胞瘤细胞

生长特性:贴壁细胞

Daoy细胞培养基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)

1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)

2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。

3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。638611221922342702850.jpg

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

GBM是原发性脑肿瘤中最常见且致死率高的恶性肿瘤。

胶质瘤干细胞(GSC)是存在于GBM中的一种具有强致瘤性的细胞类群,通常认为GSC介导了GBM的细胞异质性、耐药性和预后不良。

抑癌基因PTEN的功能失活是GBM中最常见的遗传改变之一,靶向敲除PTEN基因选择性诱发人神经干细胞发生致瘤性转化,而间充质干细胞则表现为加速衰老。

PTEN缺失的神经干细胞表现出肿瘤相关的代谢和基因表达谱改变,且获得了在免疫缺陷小鼠颅内形成肿瘤的能力。另一个抑癌基因p53的缺乏可明显增强PTEN缺失的神经干细胞的致瘤性。

研究还发现,PAX7与PTEN的表达水平在胶质瘤临床大数据库中呈现负相关性,进一步确定了PTEN-PAX7通路在神经胶质母细胞瘤发病过程中的关键作用。

临床试验发现,霉素C能够选择性诱导PTEN缺失的神经干细胞发生凋亡,揭示了未来用于PTEN突变型神经胶质母细胞瘤精准治疗的一种可能方案。

发现了PTEN保护人神经干细胞的一种新机制,并建立了新型的人类神经干细胞研究平台,以便系统精确地分析各类促使人神经干细胞发生恶性转化的因素。该研究有望为神经胶质母细胞瘤的精准治疗提供新靶点和思路。


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