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细胞:HCT-15细胞
中文名称:人T淋巴瘤细胞
生长特性:贴壁细胞
HCT-15细胞培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
从多利羊开始到现在,体细胞克隆成功率始终很低,一些科学家因此怀疑,这些研究中克隆出的动物是由混入体细胞的成体干细胞发育而成,根本不是真正的体细胞克隆。
为了检验成体干细胞和体细胞的克隆潜力,采用了造血干细胞和处于不同分化阶段的体细胞进行克隆实验,包括由造血干细胞初步分化而成的幼稚细胞——祖细胞,以及分化后的成熟体细胞——粒细胞。结果显示,粒细胞的克隆效率比造血干细胞和祖细胞更高。(U-87 MG细胞 星形胶质母细胞种属:人)
这一实验结果表明,即使是已经分化的体细胞,如造血细胞中的粒细胞,也完整地保留了形成个体的所有遗传信息,可以支持胚胎发育成为个体,而且其成功率甚至远高于分化程度较低的细胞。(UM细胞黑色素细胞种属:人)(SW620细胞 结直肠腺癌细胞 种属:人)
由于实验证明成体干细胞的克隆成功率比体细胞更低,多利羊作为第一只体细胞克隆动物的身份也因此更加真实可信。
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