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细胞:TM4细胞
中文名称:小鼠睾丸细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:D/F12+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
TM4细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
DNA合成方法取得突破
核糖核酸(RNA)不仅是遗传信息的载体,还是活细胞中生命功能的执行者,是一类重要的检测靶标,在分子生物学、医学诊断和疾病治疗中受到广泛的关注。
DT40细胞:悬浮细胞 通派细胞库培养条件:90% RIMP1640、10% FBS
一般来说,检测RNA的方法都需要首先被反转录酶进行反转录形成互补DNA(cDNA),然后在DNA聚合酶的作用下进行扩增检测。DRG细胞:贴壁细胞 通派细胞库培养条件:90% 高糖DMEM、10% FBS
研究者发现,几种DNA聚合酶具有内在的反转录酶活性,即以RNA为模板反转录为cDNA的能力,并且这种cDNA能直接作为模板进行后续的扩增实验。GIST882细胞:贴壁细胞 通派细胞库培养条件:90% 高糖DMEM、10% FBS
此项研究的发现,突破了DNA聚合酶只能以DNA为模板合成DNA的传统观念,为实现RNA的单酶和一步法检测提供了酶学基础。GIST430细胞:贴壁细胞 通派细胞库培养条件:90% 高糖DMEM、10% FBS
这种一步法检测可以大大缩短反应时间,降低实验费用,对核酸的即时检测,如血液核酸筛查、检验检疫(如艾滋病(AIDS)病毒、埃博拉病毒)等领域具有重要意义。
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