WiDr细胞人大肠癌细胞

更新时间：2024-10-11

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细胞：WiDr细胞

中文名称：人大肠癌细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640 培养基血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

WiDr细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）

1．吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2．镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3．取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4．注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

HSP90β反义核酸载体转染细胞HSP90β蛋白的表达

了解HSP90β反义核酸转染细胞中HSP90β蛋白的表达。

通过lipofectamine介导将HSP90β反义核酸重组子pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109。

(HBZY-1细胞：贴壁细胞通派细胞库培养条件：90% 低糖DMEM、10% FBS)

经用G418进行筛选，对筛选出的阳性克隆用western　blot检测HSP90β蛋白的表达。

结果:pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901，人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR，人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109后，用G418筛选出的阳性克隆，分别被命名为:AH-SGC7901，AH-SGC7901/VCR，AH-HCC7402及AH-Ec109。

（HBMEC细胞：贴壁细胞通派细胞库培养条件：90% DMEM、10% FBS）

Westernblot检测结果表明，AH-SGC7901，AH-SGC7901/VCR，AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白低于其亲本细胞。

（HConEpic细胞：贴壁细胞通派细胞库培养条件：90% 高糖DMEM、10% FBS）

结论:HSP90β反义核酸可封闭HSP90βmRNA，使pcDNA-HSP90转染的细胞AH-SGC7901，AH-SGC7901/VCR，AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白减少，为研究HSP90下调对肿瘤细胞生物学活性的影响提供了实验材料。

WiDr细胞 人大肠癌细胞