AML12细胞小鼠正常肝细胞

更新时间：2024-10-13

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细胞：AML12细胞

中文名称：小鼠正常肝细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：D/F12+10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

AML12细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）

1．吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2．镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3．取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4．注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

JCB核孔转运时间和效率取决于输入素的浓度:

组成NPC的特征蛋白为糖蛋白gp210和核孔素（nucleoporin, Nup）；糖蛋白gp210为一种跨核膜的N-连接糖蛋白，（通派细胞库供应：Ecv304细胞株）能与伴刀豆球蛋白A强烈结合，作用是将NPC固定于核膜上；

核孔素为一组由8～12种O-连接糖蛋白构成的蛋白家族，（通派细胞库供应：T-24细胞株）与麦胚凝集素(WAG)亲和，广泛分布于NPC孔周围，在细胞质与细胞核内也可检出，作用与生物分子的核质转运有关。

在分子结构上gp210有锚定NPC核膜的结合域及与亲核素蛋白结合的结合域，（通派细胞库供应：Pc-3m细胞株）而核孔素蛋白分子上至少有三类重复序列，其中N末段有FG二肽结构域［3，4］，这些序列都是生物大分子进行核质转运的分子基础。

生物大分子的细胞核质转运过程；在入核转运过程中存在于胞质中的具有核定位信号肽(nuclear location signal,NLS)的转运蛋白（简称NLS蛋白）；（通派细胞库供应：CEF细胞株）首先与NPC附近Importin α结合，Importin α再与Importin β相结合形成NLS-Importin α/β复合体。

然后NPC内核孔素蛋白通过其自身重复序列与Importin β结合，（通派细胞库供应：HEB细胞株）并将NLS-Importin α/β复合体定位(docking)在NPC胞质纤丝上，随后胞质纤丝发生弯曲将其复合体依次递呈到细胞NPC中央插销蛋白上，并与核质纤丝发生结合、解离平衡，复合体被送入细胞核内。

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