细胞：AN3CA细胞 中文名称：人子宫内膜腺癌(转移)细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO AN3CA细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
复合体在通过NPC中央孔时所耗能量由RanGTPase水解GTP提供，（通派细胞库供应：DT40细胞株）同时激活Importin β，后者可使Importin α和NLS分别从NLS-Importin α/β复合体上释放下来，NLS分子在核内马达分子(motor)推动下沿核内骨架发生固相传输（solid transfer）。 核内Importin β与RanGTP结合成二聚体再转运回胞质，（通派细胞库供应：A549细胞株 ）胞质中Importin β/RanGTP二聚体在RanGTPase作用下解离为Importin β和RanGDP，Importin β继续参与下一轮NLS蛋白的入核转运； 核内Importin α的出核转运过程较为复杂, （通派细胞库供应：Raw264.7细胞株）首先核内Importin α在CAS蛋白和RanGTP作用下形成三联体转运回胞质，然后三联体在胞质RanGTPase作用下解离为Importin α、CAS和RanGDP。 最后胞质Importin α继续参与下一轮NLS蛋白的入核转运过程，CAS则直接返回细胞核内。
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