细胞：ARO细胞 中文名称：人甲状腺癌细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO ARO细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）
JCB核孔转运时间和效率取决于输入素的浓度 在出核转运过程中具有出核转运信号肽(Nuclear export signal，NES)的核转出蛋白(简称NES蛋白）存在于细胞核内。（通派细胞库供应：RGC-5细胞株）首先NES蛋白如CRM1(一种NES蛋白，出核因子-1，Exportin 1）与核内生物大分子如hnRNA等结合，然后与RanGTP结合形成复合体跨核膜转运进入细胞质。 转运过程中会出现hn RNA的5’末端已经在胞质中而 hn RNA的3’末端还留在细胞核内，（通派细胞库供应：661W细胞株）同时该复合体还结合有hnRNA 5’帽结合蛋白CBP20/80，此外伴随hnRNA的出核转运hnRNA也会发生转录后的加工修饰，使hnRNA变为成熟mRNA。 胞质中出核复合体RanGTPase作用下解离为RanGDP和CRM1，（通派细胞库供应：DLD-1细胞株）释放出成熟mRNA。CRM1直接返回细胞核内，此时CRM1可再参与下一轮其它hnRNA分子的出核转运。 核转运蛋白中有一段保守的氨基酸序列与核质转运有关，如SV40大T抗原蛋白分子的NLS序列，（通派细胞库供应：Siha细胞株）其氨基酸序列为PKKKRKV，PKAI抑制蛋白的NES序列为LALKAGLDI，这些序列保证了核转运蛋白核转运的正确定向，实际上NLS或NES的氨基酸保守顺序可能还有其它一些种类。 NLS或NES蛋白结构除有与转运导向有关的氨基酸信号序列外，（通派细胞库供应：NIH：3T3细胞株）还有与生物大分子相结合的结合域起核转运的载体作用。
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