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HFSF细胞 人胚胎眼巩膜成纤维细胞
点击次数:165 更新时间:2024-11-04

细胞:HFSF细胞

中文名称:人胚胎眼巩膜成纤维细胞   

生长特性:贴壁细胞

培养基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

HFSF细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)

1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)

2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。

3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)


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NIH3T3细胞中PTPα基因高表达激活Src的早期细胞表型变化

利用蛋白质酪氨suan磷酸酶α (PTPα)基因转染NIH3T3细胞;(通派细胞库供应:PIEC细胞)研究PTPα诱导前后细胞生物学行为的变化, 为肿瘤形成早期机制的研究提供细胞模型;

用携带PTPα基因的四环素调控体系转染NIH3T3细胞并诱导24 h后, (通派细胞库供应:PK-15细胞)用RT-PCR和蛋白质印迹法证实PTPα在诱导细胞中的表达高于未诱导细胞, 用RT-PCR及蛋白质印迹法发现内源性Src的表达水平在诱导与未诱导细胞中没有变化;

而Src激酶的活性在诱导细胞中增高, (通派细胞库供应:PK-1细胞)并且在诱导细胞中Src的酪氨suan磷酸化水平降低. 再用透射式电子显微镜和流式细胞技术观察到诱导细胞的表型已发生变化;

实验结果表明PTPα诱导24 h使细胞的表型开始发生转化, (通派细胞库供应:MDCK细胞)这种变化很可能与PTPα表达水平升高使Src C末端的pTyr527去磷酸化而激活Src相关;

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