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细胞:Li-7细胞
中文名称:人肝癌细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
Li-7细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
SOX2在人胚胎干细胞和神经祖细胞命运决定中的作用机制
人的胚胎干细胞能够无限自我更新并具有分化全能性,即在体外特定培养条件下能够分化为来自三胚层的各种细胞类型,因而为疾病的细胞治疗提供了新的希望。(通派细胞库供应:alpha TC1 clone 6细胞)
目前,人的胚胎干细胞和诱导性多能干细胞已经成功地被应用于神经系统各类细胞的定向分化,(通派细胞库供应:K7M2 wt细胞)例如神经干/祖细胞和神经元等,为神经系统疾病的细胞治疗奠定了基础。
然而要高效安全地实现hESCs和hNPCs的定向分化,充分利用hESCs和hNPCs的潜能,(通派细胞库供应:TT细胞)首先必须清楚地认识hESCs和hNPCs自我更新和特性维持的调控网络。
ESCs和NPCs有一个共同的命运决定因子SOX2,(通派细胞库供应:Calu-1细胞)它既维持ESCs自我更新又能促进神经系统发育和NPCs的维持,因其功能多样性而备受科研界的瞩目。
Sox2对于小鼠胚胎的存活,滋养层和内细胞团的分离,(通派细胞库供应:MLO-Y4细胞)小鼠ESCs的建系和体外培养维持的作用,同时它还能促进神经系统的发育,维持大脑内的NSCs/NPCs数目,保证神经元正常分化。
然而长期以来,大部分的研究都将研究范畴局限于Sox2在模式动物ESCs和神经系统中的功能,(通派细胞库供应:HCC827细胞)而关于这一重要的核心全能性因子在hESCs和hESCs分化而来的hNPCs中的功能和作用机制研究甚少且存在争议,且SOX2是如何促进ESCs向神经分化的,其促神经下游基因有哪些都是亟待回答的重要问题。
通过ChIP-seq,RNA-seq和蛋白质谱等手段,(通派细胞库供应:LS 174T细胞)全面比较分析了SOX2在hESCs和hNPCs中的转录调控网络和蛋白质相互作用网络。
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