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RGC-5细胞 小鼠视网膜神经节细胞
点击次数:199 更新时间:2024-11-09

细胞:RGC-5细胞

中文名称:小鼠视网膜神经节细胞 

生长特性:贴壁细胞

培养基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

RGC-5细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)

1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)

2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。

3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)


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利用光遗传学"遥控"癌细胞的行为

为了解细胞信号的动态,研究需要将膜受体蛋白激活和使其失活,膜受体蛋白作为一个细胞内外世界之间的中转站。(b.End3细胞 来源:通派细胞库  脑血管内皮细胞)理想情况下,这种激活在短时间(几秒到几分钟)以及近的目标位置(微米到毫米)内发生。

如此高水平的活化精密度不能使用当前的药理学和遗传学的方法来实现。(Meth-A细胞 来源:通派细胞库)光遗传学利用光来控制细胞的活性,以及具有在时间和空间上精确地被应用和移动(施加和除去)的优点。

重新设计受体酪氨suan激酶(RTKs),(小鼠Renca细胞 来源:通派细胞库 小鼠肾癌细胞)在光的控制下,感测生长因子和激素的必要的细胞表面受体。当一个信号分子结合到细胞表面的RTKs,两种受体相互结合的过程称为二聚化作用。

这个过程会激活细胞的信号转导。(人Hek-293细胞 来源:通派细胞库 人胚肾细胞)将哺乳动物的RTKs的那些部分与光-氧-电压传感领域(鉴定黄绿藻的可逆光传感器)结合。在工程化受体中,二聚化步骤和随后的细胞信号转导现在可以通过光随着藻蛋白光感打开和关闭,以及彼此结合。

在肿瘤细胞中,工程受体的活化导致细胞形态变化,(人Hela细胞 来源:通派细胞库 人宫颈细胞)细胞增殖和基因表达,增加癌症的恶性程度的特性。在血细胞中,活化导致细胞出芽,典型的新血管形成。

RTKs通过光激活二聚化作用调节发育是哺乳动物受体的光激活二聚化作用的第一个实例。(人Intestine 407细胞 来源:通派细胞库  人小肠细胞)光控制下的RTK提供了强大的光遗传学的方法来启动细胞信号和操纵细胞的行为。

新开发的受体引发癌症和血液中内皮细胞复杂的细胞活动。(SBC-7细胞 来源:通派细胞库  肺癌细胞)这些细胞代表根据光控行为的新模型,以及能够用新的方法来确定药物。

这与癌细胞的相反,细胞信号转导的不受控制的活化导致恶性肿瘤有关的特征,信号转导的光激活可能拯救退行性疾病的细胞存活和功能。

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