细胞:RINm5f细胞 中文名称:大鼠胰岛β细胞 生长特性:贴壁细胞 培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清) 冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作) 1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min) 2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。 3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。 4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 (网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;) 
在人多种胚胎组织如胰腺、骨髓、肝脏、皮肤、骨骼肌和肺等中分离出具有多系分化潜能的原始干细胞,在适当条件下可向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、肝脏样上皮细胞、神经细胞及造血细胞分化; 将其输入接受超致死剂量射线照射的受体小鼠,可重建受体小鼠的造血功能;并可在小肠、肝、肺、皮肤及造血等多种组织中分化和再生; 分离获得的Flk1+CD31-CD34-细胞具有高度的分化潜能,在体内不仅参与造血重建及微血管损伤的修复,而且还能分化为气管、肺、消化道上皮细胞以及肝细胞等。 将新鲜人脐带血中分离和纯化的Lin-CD34+CD38-造血干/祖细胞通过宫内注射移植到胎山羊体内,成功建立了山羊/人干细胞嵌合体,为评估人造血干细胞长期移植存活、扩增和分化提供了一种大动物模型,也为组织损伤的修复、异种移植、免疫耐受性和产前治疗的研究等提供了技术平台。 应用逆转录病毒载体MSCV-BCR-ABL-IRES-GFP转染Lin-CD34+CD38-造血干/祖细胞,通过宫内注射到胎龄为45-55天的胎山羊腹腔内,使含有BCR/ABL基因的人造血干/祖细胞长期植活于山羊的不同组织中,建立了CML的大动物模型,为分析人类CML和其他疾病的发病机制及治疗提供了良好的研究手段。 研究表明,来自多种组织的ASC移植可治疗多种疾病。然而,人们对ASC分子生物学特性了解尚少,阻碍了ASC的体外培养和体内组织再生研究和应用。 |