细胞：B16-F10细胞 中文名称：小鼠皮肤黑色素瘤细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
干细胞维持多能性所必需的基因 基因通过打开或关闭其它基因作为对胚胎中信号的应答从而决定了干细胞的命运。 Foxd3可以加入到早先识别出的胚胎发生的早期阶段中胚胎控制干细胞多能性的基因大家族中，这个家族已包括Oct4、Fgf4和Sox2等成员。 这表明Foxd3的功能区或是在Oct4、Fgf4 和Sox2基因的下游，或是沿一条与它们平行的通路,通过补充进非突变的胚胎干细胞到Foxd3突变的胚胎中，可以恢复胚胎的正常发育，这说明Foxd3是在内部细胞团以及衍生细胞中活动的。 Foxd3是哺乳动物干细胞的一个关键调控基因，在人类基因组中也存在对应的版本。Foxd3基因表达是人类胚胎干细胞的一个诊断特征，这表明这个基因在小鼠和人类细胞中可能是以相似的方式执行功能的。 如果利用干细胞作为临床治疗的手段，那么识别出控制干细胞分化过程的关键调控基因如Foxd3等绝对是至为重要的。 一旦了解这这些基因是如何执行功能的，距离塑造干细胞为满足我们需要的形式就为时不远了。
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