细胞：mMSCs细胞 中文名称：小鼠骨髓间充质干细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
干细胞研究的命运伦理问题之争仍在 成人细胞中的核被移植到卵细胞后，卵细胞中某些未知的因子能将核中的生物钟回调，使它回到胚胎状态，但科学家们对这一调控过程的分子机理还一无所知，目前只知道，只有通过卵子细胞才能完成该过程。 因此卵子的获得将决定干细胞治疗能否成功，这一具有抗生素一样革命意义的新疗法，正面临着卵子供应的瓶颈。 卵子的捐献程序往往令捐献者非常不舒服，甚至疼痛，还有发生并发症的危险。为了刺激排卵，捐卵的女性需要接受激素注射，可能发生激素引发的并发症； 为了从卵巢中取出卵细胞，往往需要将一根针通过阴插入子宫；少数捐献者会发生卵巢高度刺激综合征，这些人中还有少数发生肾衰。 科学家们对卵子的捐献争议不断。即使按照伦理章程获得卵细胞，人们对卵子捐献的看法也不一样，一些科学家坚决主张不用人类卵子，而是用动物的卵细胞进行实验。 另外是否对捐献者给予报酬各方意见也不一样，有的不主张给钱，认为这样可能导致一些妇女为钱捐献卵子而忽视甚至无视捐卵子可能带来的风险；有人主张给钱，通过合同防止一些捐献者中途退出造成实验无法继续。 科学家们认为，由于卵子供应的短缺以及克隆过程的效率无法知道，克隆干细胞在治疗领域的运用范围最终不会很广，它不会像开个处方药那么简单，而是像肾移植疗法一样，只是用于少数特殊病人的治疗，比如，为挽救自己的孩子，某位妈妈捐献自己的一些卵细胞来克隆出干细胞。 |
