细胞：C2C12细胞 中文名称：小鼠成肌细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
分离:理想情况下，一种真正的干细胞系在体外处理前必须在体内环境下来鉴别出来。 但是，目前大多数分离干细胞的工作都是在体外模拟环境中进行的。体外分离技术是建立在对细胞表面标记物的识别基础上。 已经用来纯化干细胞的标记包括CD34、AC133、STRO-1、神经营养受体p7520等。分离方法包括荧光标记细胞分选、免疫磁分离和免疫吸附柱分离。 最近发现了一些新奇的细胞标记物阴性的干细胞，因此有些人对使用单一细胞标记物来分离干细胞提出了一些异议。 例如，细胞膜上的CD34表达并不总和干细胞的活动有关。在小鼠身上有大量静止的干细胞系，它们缺乏CD34的表达，但是却拥有完_全的再建能力。 一种类似的静止CD34阴性的造血干细胞也在人体上被发现。因此，利用某些特定成熟细胞的表面标记物来去除成熟细胞而保留干细胞的方法将会在未来占据更大的优势。
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