细胞：ZR-75-30细胞 中文名称：人乳腺导管癌细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
肿瘤基因组稳定性新机制 一个细胞分裂(cell pision)繁殖一次，它所有的DNA就要复制一次。而DNA复制的工具受损，或引起DNA修复损伤则可导致DNA复制压力。 肿瘤细胞繁殖的速度快，要在更短的时间内繁殖同样数量的DNA，引起复制损伤的几率就更大。 在此前的研究中，该研究组曾发现了染色体断裂的机制，染色体“脆性位点"（基因组特定区域）在细胞分裂(cell pision)期显示为间隙或不连续的间隔区，脆性位点在物种间保守，且该区域染色体易断裂，推测其对肿瘤相关联的错误基因组重排有影响。 健康的细胞基因组是稳定的，基因组重排是导致健康细胞转化为肿瘤细胞的一个重要因素之一；反过来，肿瘤细胞又需要基因组的稳定性，否则肿瘤细胞就会死亡。"应颂敏说。 根据这项研究，肿瘤细胞用M期的修复机制维持了基因组的稳定性，以满足其存活和快速增殖的需要。 在肿瘤细胞中，癌基因诱导了DNA复制压力，异常增殖的肿瘤细胞由于存在DNA复制压力，它在“规定动作"的S期进行的DNA复制留下了很多的DNA损伤，使得DNA变得很不稳定，导致了肿瘤细胞的基因组不稳定性，进而驱动癌变。 近年来，肺癌等恶性肿瘤(malignant tumor)发病率不断升高，目前的放疗、化疗等肿瘤治疗手段对正常细胞伤害巨大。 有丝分裂期DNA复制的发现对包括核酸修复、复制和肿瘤等许多领域的研究将产生重要影响。 该发现是对脆性位点机制的重新审视，即脆性位点并非染色体真正断裂，而是细胞分裂(cell pision)期新合成的DNA区域，它之所以看起来像断裂，是因为新合成的DNA区域与染色体其他区域连接不紧密。 |
