细胞：MCF7细胞 中文名称：人乳腺癌细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）
通过DNA链的机械性能来研究DNA损伤 紫外线照射会损伤DNA，削弱其复制自己和与蛋白质相互作用的能力，并通常导致皮肤癌的发生。但是，人们对于在紫外线照射下的DNA链的弹性变化了解得不多。 科学家们发展出一种技术，能够测量在紫外线照射下的DNA机械性能的改变。 科学家使用一台原子力显微镜测量了病毒DNA在紫外光下双螺旋的拆开过程。他们使用原子力显微镜的扫描针尖来拉伸DNA分子并测量因此产生的力的大小。 这些拉伸-放开的测量能够精确地测定DNA链的弹性改变。 结果表明，在紫外线的照射下，病毒DNA的弹性随着紫外线照射剂量的增大产生显著的变化。DNA的力学曲线的特征在于一个平台部分。这个特征平台的宽度随着紫外线的照射急剧地减小。 紫外线能够导致DNA与核苷酸链产生交联，同时也会使相邻的链连在一起，从而产生DNA损伤。这种交联导致的微小的结构改变能够深深地改变DNA识别分子的能力，从而完_全破坏其复制自己和与转录合成蛋白质的能力。 这个小组的科学家们还研究了合成的DNA以确定紫外线造成的影响范围。他们的结论是：在紫外线下的病毒DNA的力学性质决定于在局部区域由于大量的交联形成而导致的DNA双螺旋的伸直。 |
