细胞：FRhK-4细胞 中文名称：恒河猴胚肾细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
角化细胞转录揭示细胞分化及功能 鉴别加速成长的和衰老的角化细胞的转录有助于揭示细胞的分化、干扰素信号和Notch信号通路。 表皮的角化细胞由增殖细胞转变成早期和晚期分化层期间，在正常皮肤的角质层凋亡前，经历了高度的形态学和分子水平上的变化。角质层的形成对于皮肤正常的抵御感染功能至关重要。 在嫩或老的皮肤角化细胞中，转录过程监管细胞分化，及保持表皮厚度以抵抗感染的防御机制，但目前对这一过程了解甚少。 进一步说，因为在皮肤表面，细胞的最终分化是其复制顶点不可逆损失的一个特征，这个过程可以看作是衰老的一种形式。 但是目前一个完整的衰老角化细胞的转录图象尚不能勾勒出分化和衰老的界限。为填补这项空白，我们利用试管中球形角化细胞转录分析仪来培养增殖细胞，早期和晚期流式细胞或正经历复制性衰老的角化细胞。 球形基因表达图谱表明早期流式角化细胞同增殖细胞有些类似，而同晚期细胞差别很大，同样与复制性衰老细胞存在显著差异。流式角化细胞和复制性衰老细胞有一些相同的监管分化的基因，而后者在干扰素信号和炎症通路上的基因表达水平更高。 这些结果为研究复制性衰老和部分基因参与分化的角化细胞的自我转录程序提供了新的见解。此外，角化细胞衰老的监控机制可能包括干扰素信号通路的参与，而该通路体现了细胞保护皮肤免受感染的重要作用。 |
