细胞：CMT93细胞 中文名称：小鼠结肠癌细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
采用体内注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂zuo旋硝基精氨_酸甲基酯(L-NAME)和在体外培养基中分别加入L-NAME或次huang嘌呤以抑制卵母细胞自发成熟的3种模型, 研究了一氧化氮(NO)供体硝普_钠(SNP)对小鼠卵母细胞体内、外成熟的促进作用. 结果表明:只有腹腔注射2.5 mg/kg SNP这一剂量组能显著逆转10 mg/kg L-NAME对卵母细胞第一极体(PB1)释放的抑制作用(P < 0.05), 而高剂量SNP (10 mg/kg)使小鼠在注射药物半小时后全部死亡; 10-7, 10-6和10-5 mol/L浓度的SNP能显著促进由4 mmol/L次huang嘌呤抑制的卵丘卵母细胞复合体(CEO)中卵母细胞的体外成熟, 而10-3, 10-4, 10-8 mol/L SNP对CEO中卵母细胞的体外成熟无影响; 最适浓度的SNP(10-5和10-6 mol/L)不影响裸卵(DO)的体外成熟; 10-3 mol/L L-NAME能显著抑制CEO PB1的释放, 但对生发泡破裂(GVBD)无影响, 而10-5 mol/L SNP能显著逆转其抑制.结果提示, 卵丘细胞产生的生理剂量的NO可以促进体内、外卵母细胞的成熟.
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