细胞：FRH-0201细胞 中文名称：人胆管癌细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
筛选了约50,000个化学小分子。就像一个普通的图书馆里收藏有各种不同的图书一样，这个组合文库中也包含了各种不同的有机小分子化合物。 通过这次筛选分类，发明了一种新方法来识别具有控制干细胞分化为神经元的能力的分子。 他们将一个编码荧光素酶的报告基因导入胚胎性癌细胞中，使该基因插入到一个只在神经元中表达的基因的启动子序列下游。然后研究人员将这些胚胎性癌细胞放置到培养板独立的小孔内，每个孔内添加文库中不同的小分子。 如果任何小孔中有经过改造的胚胎性癌细胞被诱导为神经元，这些神经元就会表达荧光素酶，发出荧光。胚胎性癌起源于具有多分化潜能的原始sheng殖细胞，为高度恶性肿瘤，发病高峰在30～40岁，婴儿及儿童也可发生。 一旦发现一些细胞经某种小分子处理后分化为神经元，就用精确度更高的测定方法来进一步证实，包括用特殊标记对细胞染色，显微镜下检查个体细胞形状等。神经元具有独_特的圆形胞体和不对称的分裂过程。 最后，筛选出一些能诱导神经元分化的分子，而他们选取其中一个叫做TWS119,的小分子进行深入研究。 当他们检查TWS119诱导神经元分化的详细过程时，发现该分子与一种细胞激酶--糖原合成激酶-3beta (GSK-3beta)结合。GSK-3beta是一种多功能信号传导酶，与一些生理信号传导过程有关，并通过附加一个磷酸基到酶上，调节其它酶的活性。 操纵GSK-3beta会诱导干细胞分化为神经元，--这一事实揭示了干细胞向神经元转化过程中复杂的信号传导级联反应中的一些基本信息。TWS119调节GSK-3beta活动这一事实又说明，TWS119可能为了解控制干细胞命运的机制提供新线索，最终用于体内干细胞疗法。 Schultz 和 Ding正着手研究探明这种结合如何引导干细胞分化为神经元的确切机制。
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